酶联免疫吸附法在食品安全检测中的应用进展.docVIP

2013~2014学年第一学期 《生物技术在食品中的应用》期末考试论文 论文题目：酶联免疫吸附法在食品安全检测中的应用进展 学 院：生物与农业工程学院 专 业：食品科学与工程 班 级：XXXXX 学 号：XXXXX 姓 名：XXXXX 任课教师：XXXXX 酶联免疫吸附法在食品安全检测中的应用进展 生物与农业工程学院 4XXXX9 XXXX 摘要：文章首先介绍了酶联免疫技术的原理和方法，并从生物毒素、药物残留、致病微生物、违法使用的非食用物质、转基因食品等方面评述了其在食品安全检测中的应用。然后对ELISA技术的优点及不足进行了讨论，最后对其在食品安全检测中的广阔应用前景进行了展望。 关键词：酶联免疫；食品安全；检测；优点及不足；前景展望 “民以食为天，食以安为先”。食品安全是现代社会所面临的主要挑战，全球每年因食品致病所花费的医疗费用高达77~230亿美元[1]，这一日益突出的公共健康问题已经受到世界卫生组织的高度重视。食品安全除了影响消费者健康外，还与食品进出口贸易、国家声誉、乃至社会安定有着密切关系。 近年来，国内外食品安全事件接连不断，从生猪饲料添加剂“瘦肉精”中毒事件到非法添加“苏丹红”的番茄酱、辣椒油等食品被召回事件，再到奶品中的“三聚氰胺”事件，食品安全问题已成为当今各国政府、消费者和科技界广为关注的焦点之一。2009年2月28日，全国十一届人大常委会第七次会议通过了《中华人民共和国食品安全法》，于2009年6月1日起正式实施；同年7月20日，国务院办公厅公布了该法的配套行政法规《中华人民共和国食品安全法实施条例》[2-3]。人民和政府的高度重视迫使食品科技不断增加新的检验项目，利用新的科技手段不断提高检验水平和质量、效率。现今，食品安全检测正朝着快速、灵敏、简便的方向发展。酶联免疫技术正是迎合了这一方向而被越来越多地应用于食品安全检测领域的。 1 酶联免疫吸附法(ELISA)概述 酶联免疫吸附法是以免疫学反应为基础，将抗体、抗原的特异性反应与酶对底物的高效 催化作用相结合的一种具有高特异性和高敏感性的实验技术。根据样本中待测物质的种类及性质不同，可以设计出各种不同类型的ELISA检测方法，包括抗体夹心法、抗原夹心法、竞争法、间接法及捕获包被法、ABS-ELISA法、PCR-ELISA法、A蛋白酶联法、斑点免疫吸附法和组织印迹法等几种类型[4]。1971年瑞典科学家Engvall和perlmann首次建立了酶联免疫吸附测定方法，短短几十年，ELISA检测法的应用已渗入我们生活的许多方面，且在不断发展和完善，包括在临床诊断、医学研究、食品安全、植物资源、环境监测及生态学方面的应用。本文主要介绍ELISA在食品安全检测中的应用发展。 2 ELISA法在食品安全检测中的应用 2.1 食品中生物毒素的检测 目前发现能引起人中毒的霉菌代谢产物至少有150种以上，常见的产毒性真菌有曲霉菌属、青霉菌属镰刀菌属等，其中最常见且研究最多的是黄曲霉毒素。黄曲霉毒素B1(AFB1)是在黄曲毒素中毒性最强的天然物质，是由黄曲霉和寄生曲霉等产生的一类化合物[5]，它具有诱导突变、抑制免疫和致癌的作用，其在食品中的含量在每个国家都需要严格控制。一般而言，采用间接竞争法检测食物中的黄曲霉毒素。 才琳等[6]采用黄曲霉毒素B1与牛血清白蛋白偶联物抗原免疫小鼠获得特异性抗体，利用此抗体，进行间接竞争ELISA法试验，经过添加回收试验可知，该法可适用于食品卫生监督工作中大量样品的初期筛选检测。徐洲等[7]采用酶联免疫法对干辣椒中的黄曲霉毒素B1进行检测，结果显示，该法稳定性好，测定准确，重现性好，能有效的应用于干辣椒中黄曲霉毒素B1的检测。 2.2 食品中药物残留的测定 2.2.1 植物性食品中农药残留检测 农药残留在食品安全问题上也十分严峻。由于ELISA技术的检测优点，ELISA技术已经制作成针对各种农药的检测试剂盒，被使用到很多杀菌剂、杀虫剂的检测当中。 张婧等[8]在前期建立溴氰菊酯间接竞争ELISA检测方法的基础上，成功研制组装出溴氰菊酯残留检测ELISA试剂盒，基本满足了溴氰菊酯残留检测的需要。2011年，韦倩妮等[9]制备出三唑磷的单克隆抗体，并建立了三唑磷的间接竞争ELISA分析方法，该方法IC50为9.7μg/mL，最低检测限(LOD)为1.0μg/mL，检测线性范围为2.5～100.0μg/mL。2010年，JeeY.S等[10]对苯硫磷进行了进一步研究，根据其特征结构设计合成了5种苯硫磷的半抗原，制备出苯硫磷的高效