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细胞膜水通道 Water Channels 05级生物技术1班 王冠博 水对生命的意义 生命现象与水脱不了关系。与生命有关的一切生理、生化反应，都是在水中发生的。 当细胞以双层磷脂质组成的细胞膜隔出内外，阻绝了水与离子的通透，如何维持细胞膜内外渗透压的平衡，就变得非常重要了。 如果细胞里的水太多（或离子浓度太低），细胞会被撑破，如果细胞里的水太少（或离子浓度太高），细胞会变得干瘪，生化反应无法顺畅进行。 水的跨膜转运具有重要的生物学和生理学意义 肾对渗透压和水代谢的调节； 胃肠道、呼吸道和生殖道上皮细胞液体的分泌和吸收； 脑脊液的形成； 汗液的分泌. 在参与上述过程细胞的细胞膜上都有水通道的表达。水通道蛋白的发现使人们重新认识水转动的生理和病理生理过程。 水通道是最重要的一种细胞膜通道。 发现史 1920 年代以前,人们认为水分子以扩散机理通过细胞膜,但水凭借扩散方式通过细胞膜的通量很低以及活化能很高,难以解释水分子以很快的速度大量通过细胞膜的现象。 1950年代，人们发现水分子可以很快地通过选择性通道进入红细胞，而其他溶质分子和离子则不能通过红细胞膜。 此后三十年研究表明，细胞膜上的水通道是一种具有高度选择性的过滤器，在渗透梯度的驱动下，允许水分子通过，而质子则不能通过。 1988年，阿格雷从红细胞和肾小管中分离出一种功能为治的新的膜蛋白---CHIP28（AQP1）。 1991年，经过N2段肽链测序和整个cDNA序列测定获得了蛋白质的氨基酸序列结构，证实了这就是一直寻求的水通道。 阿格雷与他的合作者用高分辨成像技术研究AQP水通道膜 蛋白，并在2000年公布了世界第一张分辨率为0.38纳米的高清晰度立 体结构图。 54岁的化学奖得主彼得·阿格雷。 １９４９年生于美国明尼苏达州小城诺斯菲尔德，１９７４年在巴尔的摩约翰斯·霍普金斯大学博士，现为该医学院获医学学院生物化学教授和医学教授。 水孔蛋白（AQP）一、概述 AQP 是特异性跨膜转运水的蛋白家族，属主体内在蛋白家族，能显著增加细胞膜水的通透性，参与水的分泌、吸收及细胞内外水的平衡。 迄今为止，已在细菌、酵母、植物、昆虫和脊椎动物中发现至少50余种水通道。 它的种类很多，仅人体就有11种，而植物的水通道蛋白质数量更多。  二、结构特征（一）基因结构 AQP家族由一个基因组进化而来，典型的AQP基因结构含有一个较大的外显子编码AQP的氨基端半侧分子和四个较小的外显子编码AQP的羟基端半侧分子。 AQP是一种糖蛋白，分子量28KD。 （二）分子结构 AQP家族的基本结构是一个单肽链，含有6个跨膜区域及5个环，B、D环及羟基、氨基末端均在细胞内，A、C、E环定位于质膜外侧。 B、E环显著疏水，A环有N-连接糖基化部位。 整个分子为两个重复部分，在序列上是相在膜上特此呈180%26ordm;中心对称排列，水通道的这种结构或许可以解释其在水的吸收与分泌两个运动方向上所起的作用。 （二）分子结构 B、E环含有Asn-Pro-Ala(NPA)重复串连序列，这是该蛋白家族成员所共同具有的、高度同源的特征性序列 E、B环的任何变异都会引起水通道活性的下降。 每一个AQP氨基端结构及其相似，而羟基端结构各有特点，氨基端结构决定了AQP功能的共性，而羟基端结构构成了各成员功能的特异性。 （二）分子结构 AQP1的E环第189位半胱氨酸是汞抑制位点，汞离子和有机汞可以通过与C—189结合而堵塞或破坏这个孔。 编码AQP4的基因含有一个额外的外显子，外显子与其它AQP没有同源性，AQP4在E环第189 位上无半胱氨酸，对汞不敏感，又称汞不敏感水通道蛋白。 在抑制的十一种AQP中，只有AQP4和AQP7对汞不敏感，对AQP9是否对汞敏感持不同意见。 （二）分子结构 AQP2、AQP4、AQP5的B环上含有蛋白激酶A磷酸化同源顺序，现认为磷酸化与AQP的运输和门控有关。 AQP9的B换上有蛋白激酶C磷酸化位点。AQP的活性调节可能存在不同的机制。 （三）晶体结构 AQP在细胞膜中以四聚体形式存在，每一个单体都是一个独立的功能性水通道。 水通道是由4个对称排列的圆筒状亚基包绕而成的四聚体，已证明这4个亚基作为水通道的作用都是独立的，但四聚体的结构对于维持单个亚基的位置是重要的。 利用高分辨率电镜，人们计算出AQP1晶体的三维结构为沙漏（hour glass）模式：分别位于细胞内外的B、E环向上及向下行，使NPA在浆膜处析叠形成一个单水孔道。这一结构模型已被最新的电子晶体学所提供的质膜平面图所证实。 图1 　AQP1 的“砂漏”( hourglass) 模型