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提高发酵产率与速度的方法
专专题报告
专题名称: 提高发酵产率与速度的方法
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微生物反应动力学研究各种过程变量在活细胞作用下变化的规律,以及各种
反应条件对这些过程变量变化速度的影响。必须注意,微生物反应动力学研究的
对象既然时运动着的物质,就不能单纯地用传统的静态变量如质量、溶氧量、菌
体量等等进行描述,而必须涉及到许多动态变量,如细胞比生长率、基质比消耗
率、CO 比生成率、产物比生产率等等。这些动态变量一般不能直接测量,只能
根据动力学方程式间接估计。
发酵过程的传统控制方法,是凭经验对一些静态变量如pH、溶氧、残余基
质浓度等按设定点进行孤立控制,它没有系统考虑各变量之间的内在联系,也未
能反映发酵过程的动态特性,因而带有很大的局限性和盲目性。
要对发酵过程进行优化控制,必须了解达到高产所必须具备的生产菌株生长
状态(生长速率、形态、浓度等),相应的基质和氧的需要率,以及各种发酵条
件对这种生长状态和需要量的影响。由于发酵动力学是关于微生物生长率、基质
和氧消耗率、产物合成率等动态变量之间关系以及它们与发酵条件之间关系的学
问,因而掌握这些学问,就能更加系统(而不是孤立)、有效(而不是盲目)的
驾驭这些发酵条件和动态变量,发酵过程的控制问题也就应刃而解了。
按发酵动力学原理对发酵过程进行优化控制,涉及到许许多多数据的采集、
处理、综合、运算和参数估计,并要求具有实时性,这对于常规检测和控制手段
来说是不可能做到的,必须采用在线检测技术和过程控制计算机。反过来,实施
计算机系统对发酵过程的参数估计与动态优化控制,也必须以能够描述各变量变
化速率之间关系的动力学方程(即数学模型)为基础。
通过对发酵过程的知识的学习和资料的阅读,影响发酵产率及速度有以下因素:
发酵罐的温度
温度对细胞体内各种代谢影响很大,故对细胞的生长繁殖速率作用很大温度一方面是培养条件,也可认为是细胞本身特性(相对细胞对最佳温度的选择而言),一般动物细胞的培养温度为34~37℃,植物细胞培养温度最普遍为28℃左右表3-4 微生物生长的温度范围
种类 最适温度/℃ 最高耐受温度/℃ 范例 低温菌 10~20 25~30 发光细菌 中温菌 20~40 40~45 一般霉菌、放线菌、酵母、杆菌等 高温菌 50~60 70~80 嗜热脂肪芽孢杆菌 当细胞培养温度偏离最佳生长温度时,细胞的生长速率与温度有较大关系,随着温度的升高,生长速率增大;当温度超出一定范围时,由于蛋白质等细胞结构物质变性而导致生长速率急速下降。甚至死亡。
pH是培养过程的重要参数。对于微生物,能进行生长的pH值范围大约3~4个pH值单位,最适pH值范围为1~2个pH值单位。
营养物质
营养物质的种类、浓度都会影响细胞的比生长速率。在指数生长期,虽然基质浓度在发生变化,但比生长速率保持不变。当某种基质浓度下降到一定程度,成为限制性基质时,比生长速率下降,指数生长阶段结束。Monod关系式中μ与S的关系图见下图:
细胞的比生长速率与限制性基质浓度的关系
当S﹥100Ks时,μ接近于μm,只有当S﹤100Ks时,μ才随S发生明显的变化。微生物的Ks一般都很低,所以在分批培养时,尽管由于细胞的生长,基质浓度会不断下降,但在一般时间内比生长速率还是接近μm,保持指数生长。
单级连续发酵的设计原则对于正确设计一种连续发酵方案,重要的是选择适宜的稀释度D,为此必须了解产率Yx/s,生长比速率μ,最大比生长速率μm、饱和常数Ks、产物形成速率以及营养消耗速率等。
多级连续培养动力学把几个生物反应器串联起来,同一反应时间内,不断地将前一反应器的出料作为下一反应器的进料,反应器体积可以一级比一级大,也可以相同,组成了多级连续系统。
多级连续培养示意图
连续发酵的优点(1)有利于缩短发酵周期,提高劳动生产率。连续发酵减少分批发酵中的清洗、投料、消毒等辅助时间,大大缩短发酵周期和提高设备利用率。同时连续培养过程始终使细胞生长处于最高生长繁殖状态,因此可明显提高生产效率,特别是对生产周期短的产品,效果更为显著。
(2)连续发酵生产过程比较稳定、均衡,各项参数也较恒定,便于自动化控制,产品质量稳定。
(3)由于连续发酵采用管道化和自动化生严,明显降低劳动强度。发酵动力学其他参数
1.体积生产率或称单位发酵罐生产能力:系指单位容积(m3)发酵罐每小时合成产物的能力,它表示单位容积发酵设备合成产物的速度;产物为菌体细胞时,体积生产率等于μx。这个参数在发酵工业生产上更为直观和方便,因为它不是以细胞浓度而以发酵液体积为基础进行比较的。
2.发酵周期:实验
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