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- 2017-02-12 发布于湖北
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4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入已活化的醉母细胞,充分搅拌,使其混合均匀,再转移至注射器中。 为什么海藻酸钠溶液要冷却? 5、固定化酵母细胞 以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中,观察液滴在CaCl2溶液中形成凝胶珠的情形将这些凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30 min左右。 加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环 海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。 浓度过高:很难形成凝胶珠,不是圆形或椭圆形; 浓度过低:凝胶珠颜色过浅、呈白色,包埋的酵 母细胞的数目少,影响实验效果。 应当注意什么问题? 刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间,以便形成稳定的结构。 检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法: 一是用镊子夹起一个凝胶珠放在桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。 二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。 (二)用固定化细胞发酵 1、将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2-3次。 2、 将150mL质量分数为10% 的葡萄糖溶液转移到200mL的锥 形瓶中,再加入固定好的酵母细 胞,置于25
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