氯霉素及分析方法.doc

1 绪 论 1.1 引言 随着经济的快速发展，动物性食品在人们生活中所占比例越来越大，部分不法养殖户为追求经济效益最大化，不同程度在饲料中添喂人用抗生素，使畜禽肉品抗生素残留严重成为的食品问题。各国政府严格限制食品中各种有害成分，特别是、药残留等因此要获得数据准确、重现性好的分析结果，样品处理是重要环节传统的样品预处理方法有液-液萃取、索氏提取、层析、蒸馏、吸附、离心、过滤等几十种。这些方法一般要使用大量的有机溶剂，而且处理时间长、操作步骤复杂，容易导致样品损失和玷污，产生较大误差。因此，探索高准确度、快速、简单、不使用或少使用有机溶剂的样品预处理方法，[1]，其关键是优良的固相萃取材料的制备。因此制备选择性高的固相萃取材料已为研究的热点。 1.2 氯霉素样品预处理及检测方法 1.2.1 氯霉素类抗生素来源及危害 我国是一个养殖大国，近年来养殖业飞速发展。由于集约化的高密度养殖、珍贵品种引进、使用催生长激素、环境污染等因素导致了养殖环境的恶化和畜禽疾病增加，又由于畜禽疾病防治体系的不健全和欠缺用药指导和规范管理，在养殖业中滥用抗生素现象严重。比如不遵守休药期、超剂量使用、超范围使用违反国家法规规定等等，从而造成动物源食品中的抗生素的残留。这部分残留抗生素就转移到了人们体内，这会使人产生对抗生素的抗性，从而影响以后用药的效果。 CAP广泛用于各种传染性疾病的治疗，通过抑制细菌蛋白质合成而发挥抑菌作用，对大多数革兰氏阳性和阴性菌有效，对革兰氏阳性菌作用性较强，特别是对伤寒副伤寒杆菌作用最强。但CAP对人体存在严重的毒副作用，主要是抑制骨髓造血功能，引起粒细胞和血小板减少以及再生障碍性贫血；除此以外对消化系统神经系统也有严重的毒性反应，可引起视神经炎、急性中毒性表皮松懈症、角膜瘫痕、皮疹等不良反应，对新生儿、早产儿、老年人以及肝肾功能不全的病人影响更大[2]。近年有儿童服用CAP和老年人使用CAP眼膏导致死亡事件的报道。CAP的应用已有近50年的历史，但由于上述毒副作用使CAP成为第一个被禁止用于可食用动物的抗生素。 CAP在动物性食品中的残留严重威胁着人类健康，因此CAP残留问题已引起国际组织和许多国家及地区有关部门的高度重视。欧盟均在法规中规定CAP 残留限量标准为“零容许量”[3]，即不得检出。美国仅允许CAP用于非食用动物，FDA规定的CAP检出限为0.3 ng/ml，而且目前正在研究应用更灵敏的检测方法[4]。我国农业部已将CAP从2000年版的《中国兽药典》中删除，作为禁用药品。在2002年底的农业部第235号公告《动物源性食品中兽药最高残留限量》中明确规定CAP在动物性食品中不得检出，对于用酶联免疫（ELISA）和高效液相色谱分析法（HPLC）检测时要求其检测限量为1 ng/mL。 1.2.2 样品预处理方法 1.2.2.1 固体样品预处理方法 固体样品的预处理方法通常有索氏提取、超声萃取、微波辅助萃取等，近几年发展了一种新的绿色预处理技术—亚临界水萃取。 1）索氏提取 索氏提取（Soxhlet Extraction，SOX）利用虹吸原理，保持提取溶剂与提取样品充分反应，因而消除了振荡提取中的传质不平衡，其设备花费低、提取样品范围广、且易于操作，迄今仍被广泛应用。但索氏提取技术需要较长提取时间( 18h)，受提取物干扰影响较大，提取过程需要消耗大量溶剂，大量的提取溶剂不仅花费高而且对环境造成新的污染，因而此技术不宜于批量处理样品。 2）超声萃取 超声波是一种弹性机械振动波，它的强烈振动产生高速度、强烈的空化效应，从而引起的剧烈机械振动、乳化、扩散、击碎、化学效应和热效应等，加速被萃取成分的扩散释放并充分与溶剂混合，从而缩短了萃取时间，提高了萃取效率。超声萃取（Ultrasonic Extraction）设备简单，技术成熟，对被萃取物基本上没有选择性差异，可作为一种通用型的萃取方法。 Aleixo等[5]将超声萃取技术用于食品中铅和镉的萃取。他们将待测样品粉碎后加入适量硝酸，超声处理5～10min后离心，并用原子吸收进行了分析。实验结果表明条件优化后的超声萃取对蔬菜和动物组织中铅、镉的回收率可达89%～105%。超声萃取具有快速、价廉、高效的特点，与传统的索氏萃取相比，耗时短，溶剂用量少，设备简单，操作容易。但是超声萃取过程中超声波有可能破坏某些分析物，且仪器保养要求高。 3）微波辅助萃取 微波辅助萃取（Microwave-assisted Extraction，MAE）是80年代才发展起来的一项新型分离技术，微波是一种频率范围在300-300,000兆赫的电磁波，常用范围为2450兆赫，即微波产生的电场正负讯号每秒钟可以变换24.5亿次。极性分子在微波电场的作用下，以每秒24.5亿次的速率不断改变其正负方向，使