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白酒酿造优化方案(复习重点)
1、何谓流加发酵?
答:所谓流加发酵,即补料分批发酵(Fed-batch fermentation),有时又称半连续培养或半连续发酵,是指在分批发酵过程中间歇或连续地补加新鲜培养基的发酵方法
2、写出Monod方程,并写出其成立的条件和各参数的意义。
答: 条件:温度和pH恒定时
(1)菌体生长为均衡型非结构生长;
(2)培养基中只有一种底物是生长限制性底物;
(3)菌体产率系数恒定
参数意义:mmax称为最大比生长速率(h-1),Ks称为半饱和常数(g/L),S为限制性底物浓度。
3、细胞高密度培养过程存在的问题有哪些?其相应解决措施有哪些?
答:问题:1.产物或代谢副产物的积累对生长的抑制
2.氧的限制
3.HCDC中培养基粘度不断增加,引起混合不充分
4.CO2和热量的高释放率
解决措施1.控制比生长速率在产生乙酸的临界值以下
选择合适的培养基
2提高通气速率和搅拌速度
富氧空气和纯氧
在加压环境下培养
3有必要研究发酵罐中的搅拌模型,找到改善搅拌的方法。
4通过降低细胞比生长速率而部分的解决
把培养温度从37℃降到26-30℃,会降低营养吸收和生长速度,因此会减少有毒副产物和代谢产生的热量。 降低温度也能减少细胞对氧的需求。 降低重组细胞温度也有可能减少包含体形式的蛋白质的产生。
4、无反馈控制的流加策略有哪些?
答:开环(无反馈)控制
恒速流加——以预先决定的(恒定的)速率流加营养物质,比生长速率逐渐降低。
加速流加——以逐渐增加的速率流加营养物质。可补偿一些比生长速率的降低。
指数流加——以指数的速率流加营养物质。可得到恒定的比生长速率。
闭环(反馈)控制
即时DO——当DO降低时补加营养物质。
即时pH——主要碳源耗尽引起pH上升时补加营养物质。
二氧化碳释放率(CER)——CER基本正比于碳源的消耗速度。这一方法最为经常用于控制比生长速率。
细胞浓度——营养物质流加速率由细胞浓度决定。
底物浓度控制——营养物质流加速率直接由主要碳源的浓度控制
5、何谓发酵产物的理论得率?可由哪些途径计算得到?
答:假设发酵过程中完全没有菌体生成,则YP/S可达理论最高值,称为理论代谢产物产率
计算途径(a)根据化学计量关系计算
例如,由葡萄糖、氨和氧生成谷氨酸的化学计量方程为∶
依此计算 =147/180=0.82
(b)由生物化学计量关系计算
根据由底物生成目标代谢产物的代谢途径,进行代谢过程中有关NAD(P)+和ATP等辅底物的物料衡算,结合化学计量关系可求出下式
由该反应式得 =(147×12)/(13×180)=0.75
由于NADPH和ADP的再生过程要消耗底物,故依这种方法求得的值要小于单纯依据化学计量关系求得的结果。
!!用生化计量式时, 必须清楚有关的代谢途径
6、试述分批、流加和连续培养方式各自的优缺点。
7、用于发酵过程的优化技术主要有哪些?试详细叙述之。
答:基于微生物营养条件的发酵优化
基于微生物环境条件的发酵优化
基于底物运输、生化反应、产物排出-----确定不同环境条件对微生物生长和代谢产物分布的影响----优化微生物生长的物理和化学环境-----保证微生物生长处于最适条件-----奠定基础
基于微生物反应动力学的发酵优化
1分析---发酵过程的动力学参数(μ,qp,qs)流变学参数的变化特性----提出------分阶段控制策略----目的----控制环境条件在最适合细胞生长或最适合产物合成的水平
2以数学模型为基础的优化------建立动力学模型,求解参数并评价其适用性------对发酵进程和产量指标进行预测-----采用人工神经网络、专家系统、模糊逻辑控制技术A----对发酵过程进行在线状态预测和模式识别B---自适应最优化控制系统的开发、计算机模拟和实际应用
基于代谢通量分析的发酵优化
参考已知的生化反应计量关系、代谢途径、生理、特征,构建、合成不同产物的代谢网络----利用代谢通量分析方法,计算得出胞内各条代谢途径的通量变化。------分析不同发酵产品合成途径中主要代谢节点的性质,结合发酵过程中胞内能量代谢情况,提出一系列发
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