ABO血型分子基础与应用课稿.ppt

ABO血型分子基础与应用 江西省血液中心 李国良 ABO血型基本知识 Landsteiner 1900年发现ABO血型 ＡＢＯ是目前35个血型系统中最为重要的一个血型系统 ４种表型抗原：Ａ、Ｂ、Ｏ、ＡＢ ABO血型抗原主要分布在红细胞上，同时分布在白细胞、血小板和组织细胞上 分泌型ABO血型抗原为半抗原，分布在唾液、血清、尿液、精液和羊水等中 ABO血型抗原存在发育的过程 成人与新生儿ABO抗原数量比较 细胞 成人 新生儿 A1 810 000－1170 000 250 000－ 370 000 A2 240 000－ 290 000 140 000 B 610 000－ 830 000 200 000－320 000 ABO血型基本知识 ＡＢＯ血型抗原为糖蛋白和糖脂构成的多态性多糖链 ABO血型抗原的蛋白结构：前体物质+H物质(L岩藻糖）+/-特异性糖（N-乙酰半乳糖胺/D-半乳糖） ABO血型鉴定 ABO亚型 ABO亚型 正定型的凝集强度与凝集状态　 A2 亚型与合格的人源抗-A试剂反应, 可以达到4 +, Ax形成的凝集一般≤ 2 +, 混合视野凝集中凝集的红细胞≥ 50%, 通常判定为A3 或B3 型, 混合视野凝集中凝集的红细胞10%, 则通常判定为“Aend”或“ Bend”。 部分亚型红细胞和抗体在4 ℃放置10-30 min后, 凝集强度会显著增强 各种A亚型血清学表现 Phenotype Red cells tested With anti-sera Serum tested with Known red cells Salivaof secretors Anti-A -B -AB -A1 -H A1 A2 B O A1 V _ V V _ _ _ V _ A and H Aint +++ _ V ++ +++ _ _ V _ A and H A2 +++ _ V _ ++ Some-times. + _ V _ A and H A3 ++mf _ ++mf _ +++ Occa-sionally. + _ V _ A and H Am -/w+ _ -/w+ _ V _ _ V _ A and H Ax -/W+ _ +/++ _ V Fre-quently + _ V _ H 各种弱A亚型的鉴别程序 弱凝集 A3/ Ax/ Aend 混合外观(Mf）A60 A3 10％ 红细胞呈十分弱的mf凝集 Aend 只与抗-AB呈弱凝集 Ax 不凝集 吸附放散抗-A Am/ Ay / Ael 容易吸附放散抗-A Am 分泌型唾液中有一定量的A物质 不容易吸附放散抗-A Ay 分泌型唾液含少量的A物质 吸附放散抗-A Ael 分泌型唾液只含H物质无A物质 ABO亚型的分布 最常见的ABO亚型存在于A型人群中, A型个体大多数属于A1 型, 少数属于Aint、A2 型。 ABO亚型的分布 Aint可以看做是A1 和A2型的过渡型, 数量多于A2 型 除去A1、Aint、A2 型之外, 其他ABO亚型相当罕见, 根据现有数据, 在我国约为1.5/1万或略多, 而且B亚型的数量明显多于A亚型 类孟买型在我国不同区域人群中的分布比例约为1/8 000— 1/16 000 ABO亚型的分布 ABO血型基因 ABO位点 9q34.1－9q34.2 7个外显子，跨越基因组DNA 18kb 外显子1～7 ，28bp ～691bp不等 主要编码顺序：exon 6 和 exon 7 ABO血型基因 ABO抗原不是ABO基因的直接产物 ——A基因：α(1, 3)N-乙酰氨基半乳糖基转移酶 ——B基因：D半乳糖基转移酶 ——O基因：无有效的基因产物 ABO血型基因 ABO基因的参比序列：A*101 在A1基因的基础上?核苷酸突变?糖基转移酶改变?影响催化活性?抗原改变 A和B基因ｃDNA序列有7个碱基不同，其中４个引起氨基酸的替换，分别是176、235、266和268 O基因在261位单碱基缺失造成移码突变，终止密码提早出现，其它序列与A相同 ABO基因在cDNA和氨基酸上的差异 A1 allele (A*101) A1 allele (A*102)nt467(C→T)=aa156(pro→leu) B allele nt291(A→G)； nt526(C→G) =aa176(Arg→Gly)； nt657(C→T)； nt703(G→A) =aa235(gly→Ser)； nt796(C→A) =a