含有药材原粉丸微生物检验方法适用性验证通用模板.docx

XXXX丸微生物限度检查方法适用性验证 检品信息 检品名称 XXXX丸 检品批号 规格 6g/丸 检验人 制剂单位 XXXX制剂中心 检验日期 检验依据 《中国药典》2015版四部通则1105非无菌药品微生物限度检查法 实验仪器 仪器编号 仪器名称 检定有效期 是否使用 YQ-JY-043 蒸汽压力灭菌器 2017年5月 是 YQ-JY-002 电子天平 2017年5月 是 YQ-JY-039 净化工作台 2017年5月 是 YQ-JY-023 生化培养箱 2017年5月 是 YQ-JY-024 霉菌培养箱 2017年5月 是 培养基 批号 培养基名称 配制日期 是否使用 151028 胰酪大豆胨琼脂培养基 2016年6月1日 是沙氏葡萄糖琼脂培养基 2016年6月1日 是 151009 胰酪大豆胨液体培养基 2016年6月1日 是麦康凯液体培养基 2016年6月1日 是 140312 麦康凯琼脂培养基 2016年6月1日 是 151125 肠道菌群增菌液培养基 2016年6月1日 是 151123 紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基 2016年6月1日 是RV沙门菌增菌液体培养基 2016年6月1日 是 151214 木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基 2016年6月1日 是 151228 三糖铁琼脂培养基 2016年6月1日 是 实验用菌 阳性对照菌 菌种编号 菌种批号 传代数 是否使用 金黄色葡萄球菌 CMCC（B）26 003 1-2(15)-6 3 是 铜绿假单胞菌 CMCC（B）10 104 1-2(15)-6 3 是 枯草芽孢杆菌 CMCC（B）63 501 1-2(15)-6 3 是 白色念珠菌 CMCC（F）98 001 1-2(15)-6 3 是 黑曲霉菌 CMCC（F）98 003 1-2(15)-6 3 是 大肠埃希菌 CMCC（B）44 102 1-2(15)-6 3 是 乙型副伤寒沙门菌 CMCC（B）50 094 S1-2(15)-6 3 是 1.实验方案： 本品为非无菌含药材原粉的中药固体口服给药制剂（不含豆豉、神曲等发酵原粉丸剂），非无菌微生物限度标准应为： 需氧菌数：不得过3×104cfu/g 霉菌酵母菌数：不得过102cfu/g 控制菌：大肠埃希菌（1g）不得检出；沙门菌（10g）不得检出；耐胆盐革兰氏阴性菌应小于102（1g）。 1.1验证试验目的 确认所采用的方法适用于本品的微生物限度检查，即确认本品在该检验量及该检验条件下无抑菌活性或其抑菌活性已被充分消除到可以忽略不计，保证检验结果的准确、可靠及检验方法的完整性。 1.2微生物限度检查方法 取本品10g，加入胰酪大豆胨液体培养基100ml，振摇至分散均匀，作为1:10供试液；取本品10g加入胰酪大豆胨液体培养基200ml，振摇至分散均匀，作为1:20供试液。取1:20供试液1ml注入无菌平皿中依法检查（《中国药典》2015版1105非无菌药品微生物限度检查法：微生物计数法）需氧菌总数。取1:10供试液1ml注入无菌平皿中，依法检查（《中国药典》2015版1106非无菌药品微生物限度检查法：微生物计数法）检查霉菌酵母菌总数。 取1:10供试液10ml，置胰酪大豆胨液体培养基100ml中，依法（《中国药典》2015版1106非无菌药品微生物限度检查法：控制菌检查法）检查大肠埃希菌。 取1:10供试液10ml，置胰酪大豆胨液体培养基100ml中，依法（《中国药典》2015版1106非无菌药品微生物限度检查法：控制菌检查法）检查耐胆盐革兰阴性菌。 取10g供试品置胰酪大豆胨液体培养基100ml中，依法（《中国药典》2015版1106非无菌药品微生物限度检查法：控制菌检查法）检查沙门菌。 2培养基适用性检查 2.1菌液制备 2.1.1 取经35℃培养24小时的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的大肠埃希菌的新鲜培养物各1ml，用0.9%无菌NaCl溶液10倍稀释，做活菌计数，备用。取经25℃培养48小时的白色念珠菌的新鲜培养物1ml，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释，做活菌计数，备用。 2.1.2 取经25℃培养5～7天的黑曲霉的新鲜培养物至，加入3~5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌NaCl溶液，将孢子洗脱。然后，采用适宜方法吸出孢子悬液至无菌试管中取培养物1ml加9ml0.9%无菌NaCl溶液（含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80）十倍稀释至10－5做活菌计数备用。菌液制备后在常温下放置，并在2小时内使用