直链淀粉测定仪对芭蕉芋淀粉的提取分离鉴定及含量测定分析.docVIP

直链淀粉测定仪对芭蕉芋淀粉的提取、分离、鉴定及含量测定分析 摘 要：本实验首先采用正交设计法优化芭蕉芋淀粉的提取工艺，并进行了实验验证，确定其最佳工艺为：料液比为1:2，静止时间为2h，洗涤次数为4次。然后采用浙江托普仪器的DPCZ-II直链淀粉测定仪测定直链淀粉，接着采用热碱法和正丁醇-异戊醇结晶法制备得到了芭蕉芋直链淀粉的纯品，并对其从三个方面加以评定，得知碘-直链淀粉的最大紫外吸收波长为600nm、直链淀粉含量为87.19%、碘结合量为10.4。最后以制取得到的芭蕉芋直链淀粉和玉米支链淀粉为标准物制定标准曲线，测定得到了芭蕉芋淀粉中直链淀粉的含量为77.94%。这将对芭蕉芋淀粉的分子基础研究具有一定的意义。 关键词：芭蕉芋；淀粉；直链淀粉测定仪；工艺优化；含量测定 芭蕉芋(Canna edulisKer)是美人蕉科美人蕉属的多年生单子叶草本植物，又名蕉芋、汗藕、蕉藕、姜芋、食用美人蕉、状元芋、番鬼芋、藕芋、蕉芽、飞天子、香珠、Cu Giong (越南)、Ubi Larut (马来群岛)、Achira (南美洲)、Sagu (委内瑞拉)等，始载于《中国经济植物志》，主产于我国南部省区[1-3]。目前，主要研究了原淀粉的分子结构、组织结构、物理化学性质和变性淀粉的制备工艺及其性质[3-7]。 另外，还初步研究了以芭蕉芋为原料生产葡萄糖、粉丝、酒精、甘油、酒糟酸乳化饲料、浆料、塑料薄膜、可食性薄膜和面条等[8-9]。 近年来，随着政府的大力支持，芭蕉芋被广泛种植，发展潜力十分巨大，将有可能成为新淀粉的主要来源。然而，芭蕉芋的研究开发还处于起始阶段，其综合开发利用有待进一步加强，尤其应大力开展分子基础方面的研究。 1 材料与方法 1.1 材料与试剂 芭蕉芋 、氢氧化钠、盐酸、正丁醇、异戊醇、高锰酸钾、硫酸铁、碘化钾、碘酸钾、硫酸铜、酒石酸钾钠、硫酸，冰乙酸均为分析纯；支链淀粉(A8515) Sigma公司；水为双蒸馏水。 1.2 仪器与设备 Biofuge Pmimo R型台式冷冻高速离心机；DPCZ-II直链淀粉测定仪，浙江托普仪器有限公司；90-2恒温磁力搅拌器；冰箱；DZF-6020型真空干燥箱；ZD-2A型自动电位滴定仪；真空抽滤装置；DU-800 紫外分光光度计；DHG-9140A型电热恒温鼓风干燥箱；多功能红外水分测定仪；电热恒温水浴锅；冷冻干燥机；SK-1型快速混匀器。 1.3 方法 1.3.1 芭蕉芋淀粉的制备 1.3.1.1 提取方法及优化 将新鲜的芭蕉芋切成小块，放入研钵中捣碎，加入适量的水(含0.1%抗坏血酸)，纱布过滤后用水洗涤，滤渣继续用木棒研磨后重复处理。过滤得到的淀粉乳液置于烧杯中，静止数小时，倒掉上层清液，加水搅拌继续静止同样时间，重复洗涤数次，然后用布氏漏斗减压抽滤，得到湿淀粉，冷冻干燥后得到原淀粉，常温下保存备用[10]。 经参考文献，拟考察料液比、静止时间和洗涤次数三个因素，用L9(34)正交表设计试验，以淀粉产量为考察指标。提取因素和水平见表1，取新鲜芭蕉芋小块30 g，分别制备样品。 1.3.1.2 优选工艺验证实验 取新鲜芭蕉芋块根，按优选工艺提取芭蕉芋淀粉。 1.3.2 芭蕉芋直链淀粉的分离及纯化 称取芭蕉芋淀粉10g，加少量无水乙醇使样品湿润，再加入350ml 0.5mol/L氢氧化钠，放入沸水浴中加热搅拌20min至完全分散，冷却，以4000r /min 离心20min，取上清液用1.5mol/L盐酸调至pH6.5，然后加入1：1(V/V)正丁醇_异戊醇80ml，在沸水浴中加热搅拌10min，冷却至室温。移入冰箱内(2～4℃)静置24h去掉上层污物层，以4000r/min离心15min，弃掉上清液，沉淀物即为粗直链淀粉[11 ]。 用饱和正丁醇水溶液洗涤沉淀物，4000r/min离心15min，将沉淀物转入200ml饱和正丁醇水溶液中，在沸水浴中加热溶解，冷却至室温，放入冰箱内(2～4℃)24 h，弃去上层污物层，以4000r/min离心15min，沉淀物再加饱和正丁醇水溶液加热溶解，反复纯化三次。最后沉淀物用无水乙醇反复洗涤离心3～4次，在真空干燥箱中(55～56℃)干燥。即得直链淀粉纯品。 1.3.3 芭蕉芋直链淀粉的质量鉴定 1.3.3.1 碘-淀粉复合物吸收光谱测定 称取100mg提取得到的直链淀粉于100ml烧杯中，加入1.0ml无水乙醇湿润样品，再加入9.0ml 1mol/L氢氧化钠溶液于85℃水浴中分散10min，移入100ml容量瓶，用70ml水分数次洗涤烧杯，洗涤液一并移入容量瓶中，加水至刻度，剧烈摇匀后得到1mg/ml直链淀粉溶液，取此溶液1ml和0.09mol/L氢氧化钠溶液3ml 加50ml水稀释后，再加入1mol/L乙酸溶液1ml和碘试剂1