离子色谱法电导检测白酒中的甜蜜素.doc

离子色谱法电导检测白酒中的甜蜜素 摘要：建立了离子色谱-电导检测白酒中的甜蜜素。选用SH-Anion- 2 阴离子交换色谱柱，以碳酸钠（Na2CO3）作淋洗液，样品经过处理后进入离子色谱，运用电导检测。该法在0.05-10.0 mg/L范围内线性关系良好，R2＞0.9998，检测限为10.0 μg/L，加标回收率在89.0~105.0%之间。方法简便易行，灵敏度高，结果准确。 关键词：离子色谱，电导检测，白酒，甜蜜素 甜蜜素，学名为环己基氨基磺酸钠，是我国目前广泛使用的一种甜味剂。其甜度是蔗糖的300~500倍。少数白酒生产企业为改善白酒口感，添加了这种甜味剂。在我国强制性标准中，不允许向白酒产品中添加甜味剂。然而由于缺少使用于白酒中甜味剂的检测方法，各级检验部门对于白酒中微量甜味剂的检测往往无能为力，特别是遇到阳性样品时，现行方法存在无法确证的困难。GB/T5009.97-2003[1]甜味剂的检测方法已被卫生部监督司列入不适合白酒检测范围。文献中报道的对白酒中甜蜜素的检测有分光光度间接法[2]，液相色谱法[3]和 HPLC-MS[4]。虽然分光光度间接法定性方便，但是检测灵敏度不理想；而液相色谱法采用衍生手段后进行检测，操作过程较复杂；HPLC-MS方法的检测灵敏度高，但是仪器成本高；本文运用离子色谱对白酒中的甜蜜素进行检测，仪器运行成本低，检测灵敏度高，定量准确。 1 材料与方法 1.1 仪器与试剂 离子色谱仪：CIC-200（青岛盛瀚色谱技术有限公司）；HW2000色谱工作站（上海千谱软件有限公司）；色谱柱：SH-Anion-2型阴离子色谱柱（日本）；SHY自再生抑制器（青岛盛瀚色谱技术有限公司）；二氧化碳抑制器(青岛盛瀚色谱技术有限公司）；纯水机（UPT-Ⅰ-5，优普纯水仪器设备有限公司，上海）。ODS-SPE柱（Cleanert IC-ODS 500mg，青岛盛瀚） 碳酸钠为基准试剂（国药集团化学试剂有限公司）；白酒样品为市售某品牌牛奶；甲醇为色谱纯（迪马，美国）；环己基氨基磺酸钠标准物质（国家标准物质中心） 1.2 色谱条件 SH-Anion-2型阴离子色谱柱，采用2 mmol/L Na2CO3淋洗液等度淋洗，电导检测，淋洗液流速为0.8 ml/min，100μL定量环，峰面积定量。 1.3 溶液的配制 淋洗液的配制：移取4.20 ml 0.24 mol/L MSA 储备液于500 mL容量瓶中，定容至所需要的刻度，得到4.20 mmol/L Na2CO3淋洗液。 标准溶液（1000 mg/L）的配制：精确称取0.1g 环己基氨基磺酸钠标准品，于25 mL烧杯中，用玻璃棒不时搅拌，待溶解完全后，移至100 mL容量瓶中，并定容至刻度。 其它浓度的标准溶液，均在1000 mg/L标准溶液的基础上，逐级稀释得到。 1.4 白酒样品的制备 白酒样品用二次去离子水稀释100倍后，过ODS柱除去大分子的有机物。 2 结果与分析 2.1 色谱条件的优化 2.1.1 检测器的选用 环己基氨基磺酸结构本身不具有光谱吸收的基团，因此不能运用紫外检测器进行直接检 测；而环己基氨基磺酸钠在水溶液中完全电离，产生环己基氨基磺酸阴离子，且pka远远小于7，满足电导检测的条件。通过试验证明，运用电导检测器检测甜蜜素，其电导响应高。 2.1.2 色谱柱的选择 由于酒中含有较多的小分子有机酸，而环己基氨基磺酸的保留特点很特殊，因此需要高 容量的亲水性色谱柱，才能保证环己基氨基磺酸与其它阴离子和有机酸的分离。选用 SH-Anion-2型阴离子色谱柱，有机酸和常规阴离子不会对环己基氨基磺酸产生干扰。图1为白酒样品中甜蜜素加标色谱图。 图1 白酒样品中甜蜜素加标色谱图 Fig. Chromatogram of cylamate added in liquor sample 色谱峰：1，甜蜜素 2.1.3淋洗液浓度的优化 在固定流速的情况下，改变淋洗液的浓度分别为，1.0mmol/L Na2CO3 ，2.0mmol/L Na2CO3和 5mmol/L Na2CO3，观察色谱峰与其它离子的分离情况。因此以2.0 mmol/LNa2CO3为淋洗条件，可以实现甜蜜素与其它离子的基线分离。 2.2 线性范围和检测限 在选定的色谱条件下，配制一系列标准溶液液进行分析测试，结果表明：在(0.05～10)mg/L范围内，其浓度与峰面积有良好的线性关系，以峰面积Y对甜蜜素的浓度X(mg/L)的线性方程为：Y=5E+005X-6+2E+004,线性相关系数为r2=0.9999.以3倍的信噪比计算方法的检出限为10μg/L. 2.3