细胞株管理规定.docVIP

细胞株管理规定 目前负责人员：薛雪、张旭、蒋乔、马会利、马晓溦 目前实验室拥有的细胞株： 细胞株名称 种类 来源 负责人 现存位置 KB-3-1 人宫颈上皮癌细胞 NIH 薛雪 Track5box1 KB-CP20 人口腔表皮癌顺铂抗性细胞(20μg/ml) NIH 薛雪 Track5box2.3 BEL 7404 人肝癌细胞 NIH 张旭 Track5box4 7404-CP20 人肝癌顺铂抗性细胞(20μg/ml) NIH 张旭 Track5box5 PC-3 人前列腺癌细胞 Paul Wang 蒋乔 Track5box8 PC3-R 人前列腺癌顺铂抗性细胞(1μg/ml) 王英泽筛选 蒋乔 Track4box3 Hela 人宫颈癌细胞 来源广泛 蒋乔 Track3box1 Hela-luc 人宫颈癌细胞 蒋乔 Track3box2 MCF-7 人乳腺癌细胞 孟洁 马会利 Track3box5 MCF-7R 人乳腺癌阿霉素细胞 孟洁 马会利 Track4box4 Caco-2 人结肠癌细胞 西安交大 薛雪 RTE 大鼠气管上皮细胞 协和细胞中心 蒋乔 Track1box5 293T 人胚肾细胞 生物物理所 张旭 Track3box4 HepG2 人肝癌细胞 聂广军组 马会利 Track3box6 BHK 小鼠肾细胞 生物物理所 马晓溦 B16 小鼠黑素瘤 不明 马晓溦 H24 小鼠肝癌 不明 马晓溦 RAW 巨噬细胞 聂广军组 马晓溦 负责人职责： 如有新进细胞株，请告知单姝娴，由单姝娴分配给专门负责人进行细胞的冻存保种； 实验室任何人员需要复苏细胞，需要提前一个工作日通知该细胞株的负责人，经允许后方可使用； 负责人需监督使用人员做好存取细胞记录，使用人员的细胞复苏情况必须反馈给负责人，并做好记录； 定期整理细胞株：，负责人需对对半年以上未复苏的细胞株进行维护，重新复苏并做好细胞状态的记录； 为防止细胞变异，负责人仅对复苏细胞的Y1-Y3代进行冻存，密度不小于1/4皿；对肿瘤细胞的形态，生长周期进行密切观察，如发生明显变化，则不做冻存处理； 若复苏细胞人员复苏同一细胞株两次均未成活，需通知负责人进行检查和复苏，如贮存细胞确实出现问题，则及时清理。 冻存条件及方法： 冻存条件：建议采用40-50%FBS+8%-10%DMSO+该细胞株无血清培养基 冻存方法： 梯度冻存：4℃——1h；-20℃——30min；-80℃ 使用冻存盒：直接放入-80℃冰箱中过夜（有些细胞不适应此种方法） 复苏方法： 打开水浴，将培养基放入水浴中，待其稳定至37℃； 细胞从液氮内取出后，应快速将细胞放于37℃ 将溶化后将细胞冻存悬液离心，转速1000rpm，3min 细胞在培养箱中贴壁24h后，更换新鲜培养基，待其长满，进行传代。 液氮罐的使用： 开启液氮罐时，请带好防护工具，防止冻伤； 使用细胞的人员应做好复苏记录，格式如下： 日期 开启人/冻存人 细胞株/位置 开启原因 复苏结果 2010-5-10 张旭/薛雪 KB-3-1 / 蓝-2-3(5) 目前培养细胞状态改变 死亡 负责人应做好细胞整理保藏记录，格式如下： 细胞株 冻存时间/负责人 复苏时间/负责人 取出位置 冻存位置 复苏结果 KB-CP20 2009-08-07/王英泽 2010-04-15/薛雪 红-3-5(6) 红-3-5(6-10) 成活 请使用细胞的同学珍惜冻存细胞同学的劳动，禁止短期内取用同一细胞株的多 管冻存细胞，复苏后自行冻存细胞以供自己的实验使用，存于-80℃冰箱，必须写明细胞种类、冻存时间、冻存人等细节。 细胞复苏记录 日期 开启人/冻存人 细胞株/位置 开启原因 复苏结果 细胞整理保藏记录 细胞株 冻存时间/负责人 复苏时间/负责人 取出位置 冻存位置 复苏结果