美白化妆品中维生素C含量的测定.docxVIP

美白化妆品中维生素C含量的测定1．实验部分1．1 仪器和试剂高效液相色谱仪，UV-230紫外可见检测仪，电子天平，一次性注射器，0.45um滤膜，精密pH计。甲醇（色谱纯），维生素C（标准品），醋酸，醋酸钠，偏磷酸，磷酸，草酸均匀分析纯。1．2 溶液的配制1．2．1 标准溶液的配制（1）准确称取维生素c标准品5.02mg，用3％的偏磷酸溶液溶解并定容至100ml，得到维生素c含量为50。2ug/ml的标准溶液。然后从中分别取2，4，6，8，10ml标准溶液转移至5割50ml容量瓶中，定容，摇匀得到浓度比为1，2，3，4，5的一系列标准溶液。这些标准溶液使用前采用微孔滤膜过虑。1．2．2 样品溶液的配制（2）样品1（含有维生素C的某品牌乳液）溶液的配制用分析天平准确称量样品乳液约1g，置于50ml容量瓶中，加入甲醇约45ml将乳液稀释。盖好塞子，在60摄氏度水中水浴加热并振摇使维生素C充分溶解，然后加入适量甲醇定容至刻度，摇匀并静置一段时间。从中取甲醇溶液10ml，用0.45um滤膜过滤后直接进样1．3 液相色谱条件色谱柱：ODS-C18柱（200 x 4.6mm id5um）;流动相：pH值为5.69的HAc-NaAc缓冲溶液／甲醇＝80／20；流速：1.0ml／min; 进样量：20uL；检测波长254nm。2．结果2．1 检测波长的选择取维生素 C标准溶液样品,在 200~400nm处进行紫外光谱扫描,从扫描数据看出波长 254nm接近最大吸收 , 254nm 又是常用波长 ,因此 ,将 254nm作为检测波长。2. 2 流动相的选择因为维生素 C 具有较强的还原性 ,常规保存容易被破坏 ,而它在酸性溶液中却很稳定。为保证维生素 C 在测定过程中一直处于稳定状态 ,所用流动相应保证合适的酸度。在选择流动相之前 ,配制了 3种流动相,分别是HAc - NaAc缓冲液/甲醇、 H3 PO4 缓冲溶液 /甲醇、0. 05%的草酸溶液。采用 pH值为 5. 69的HAc - NaAc缓冲液/甲醇为流动相 ,因为两种样品的维生素 C 在使用这种流动相时均有良好的分离效果。为进一步提高分离效果 ,再改变流动相中HAc - NaAc缓冲溶液和甲醇的体积比进行试验 ,发现当缓冲液与甲醇体积比为80 /20时 ,两种样品中的维生素C具有最佳的分离效果。因此,选定 pH值为 5. 69的HAc-NaAc缓冲溶液/甲醇 (80/20,V/V)为流动相。2. 3 标准工作曲线的绘制和样品中维生素C的定量测定将配制好的维生素 C标准系列溶液在上述色谱条件进行分析，以样品峰面积和样品浓度进行线性回归，回归方程为：y=103.2+854.8x，线性相关系数为: R=0.9991.根据标准曲线和样品中维生素c的封面面积可以计算出样品中维生素c的含量。