第九章色谱分析法导论.pptVIP

但该理论是在理想情况下导出的，未考虑分子扩散因素、其它动力学因素对柱内传质的影响。因此它不能解释： 1）峰形为什么会扩张？ 2）影响柱效的动力学因素是什么？ 工作曲线法 要求：固定相→离子交换树脂；流动相→水为溶剂的缓冲溶液；被分离组分：离子型的有机物或无机物。 分离机制见图示，阳离子交换树脂交换平衡： 选择性系数 注：Ks与离子的电荷数、水合离子半径、流动相质、离子交换树脂性质以及温度有关。 *9 基本类型色谱法的分离机制 *9-3离子交换色谱法 分离机制：依据被测组分与离子交换剂交换能力(亲和力)不同而实现分离。 图9-12 阳离子交换色谱示意图 1. 固定离子； 2. 可交换离子 R. 树脂骨架； m. 流动相 m 2 1 R *9 基本类型色谱法的分离机制 *9-3离子交换色谱法 要求：固定相→多孔性凝胶； 流动相是水→凝胶过滤色谱； 流动相是有机溶剂→凝胶渗透色谱。 分离机制：见图示 渗透系数 注：Kp仅取决于待测分子尺寸和凝胶孔径大小，与流动相的性质无关。 *9 基本类型色谱法的分离机制*9-4 空间排阻色谱法 分离机制：利用被测组分分子大小不同、在固定相上选择性渗透实现分离。 图9－13 凝胶色谱分离示意图 Ge.凝胶； m.流动相 *9基本类型色谱法的分离机制 *9-3离子交换色谱法 *9基本类型色谱法的分离机制 结论 四种色谱的分离机制各不相同，分别形成：吸附平衡、分配平衡、离子交换平衡和渗透平衡。 K分别为吸附系数，狭义分配系数，选择性系数和渗透系数。 除了凝胶色谱法中的K仅与待测分子大小尺寸、凝胶孔径大小有关外，其他三种K值都受组分的性质、流动相的性质、固定相的性质以及柱温的影响。 9.4 色谱定性和定量分析方法 试样的预处理 定性分析 定量分析 9.4.1 试样的预处理 1.化学衍生化 在气相色谱分析中，通过合适的化学反应改变组分的色谱分离性质，以及利用生成特殊衍生物改进组分的分离或增强检测器响应的方法称为化学衍生化法。 例1： 强极性的三乙醇胺在柱中保留时间过长，不适于气相色谱分析。若先让其转变为极性较小的三甲基硅烷基衍生物，则可减少保留时间，获得较好的分离效果。 金属离子一般不能直接用气相色谱分离，但用β一二酮类试剂与金属离子反应形成挥发性螫合物后，即可用气相色谱法分离。 2.裂解色谱技术 在气相色谱法中，将一些难挥发的固体试样在裂解器中裂解成低分子碎片后，再由载气带入色谱仪进行分析的技术称为裂解色谱技术。 3.分离与富集 在气相色谱分离前，有时还需预先把不适于气相色谱直接分离的物质如无机盐、高聚物等从试样中分离除去，或对低含量组分进行预富集。 例如2： 当试样中含有大量的水、乙醇或其它能被固定相强烈吸收的物质时，会使一些色谱柱损坏，需要预先分离除去。 对试样中某些痕量组分分析时，因检测器灵敏度不能满足要求，常需要预先进行富集。 9.4.2 定性分析 1.利用保留值与已知物对照定性 当有待测组分的纯样品时，用对照法进行定性极为简单。实验时，可采用单柱比较法，双柱比较法或峰高加入法。 a.单柱比较法 在相同的色谱条件下，分别对已知纯样及待测试样进行色谱分析，得到两张色谱图，然后比较其保留时间或保留体积，当两者的参数相同时，即可认为待测试样中有纯样品那种组分存在。 b.双柱比较法 在两个极性完全不同的色谱柱上，测定纯样品和待测组分在其上的保留参数，如果都相同，则可较准确地判断试样中有与此纯样相同的物质存在。双柱法比单柱法更为可靠，因为有些不同的化合物会在某一固定液上表现出相同的色谱性质。 c.峰高加入法 ?? ? 将已知纯样加入待测组分后再进行一次分析，然后与原来的待测组分的色谱图进行比较，若前者的色谱峰增高，则可认为加入的已知纯物与样品中的某一组分为同一化合物。当进样量很低时，如果峰不重合，峰中出现转折，或者半峰宽变宽，则一般可以肯定试样中不含与所加已知纯物相同的化合物。 2.利用保留值的经验规律定性 a.碳数规律 大量实验事实证明，在一定温度下，同系物的调整保留时间的对数与分子中碳原子数成线性关系：??????????????????????? lgtR＇= A1n + C1 式中A1和C1是常数，n（n≥3）为分子中的碳原子数。该式说明，如果知道某一同系物中两个或更多组分的调整保留值，则可根据上式推知同系物中其它组分的调整保留值。 ? b.沸点规律?? 同族具有相同碳数碳链的异构体化合物，其调整保留时间的对数