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诊断畜禽寄生虫病的一种新技术
诊断畜禽寄生虫病的一种新技术
多年来,我们研究了一种定性、定量检测寄生虫病的新技术,包括新虫卵计数器(已获国家专利)、操作程序、每克粪中虫卵数计算公式、对被检粪便采 样量、粪便沉淀液的稀释体积和技术的可行性(即 在粪便沉淀液中难以分布均匀的蛭形巨吻棘头虫虫 卵、片形吸虫虫卵的分布均匀性进行了测定)进行了研究,并进行了临床试验检验,结果表明本技术用于定性、定量检测诊断寄生虫病是可靠的。
1 新虫卵计数器制作
在一张2mm厚的载玻片上画2个1cm 2 的方格,在每个方格内,每间隔1mm 画1根直线(避免虫卵的重复和遗漏计数),然后用3根1mm 厚的玻璃条分别粘在两方格的中间和两边,再 将另一张 1mm 厚的玻片粘在玻璃条上,形成两个计 数室,即一个计数室的体积为 0.1mL ,见 图1。
2 其它器具
显微镜、秤(天平或其它小计量秤)、量筒、容器(烧杯、塑料杯或铁盅等均可)、铜筛网、 移液管。
3 操作程序
3.1 定量秤取被检家畜粪便(检测片形吸虫病时,最少被检羊粪便为 4.7g 、牛粪便 27.5g ),用定量粪便的3~5倍体积水调成糊。
3.2 用铜筛网过滤,并用适量水边冲洗边过滤。
3.3 将滤液沉淀30min(检测较大虫卵如片形吸虫 虫卵、前后盘吸虫虫卵、棘头虫虫卵等的沉淀时间为15~20min ,检测球虫卵囊等的沉淀时间为1h );弃上清液,再加水沉淀,重复3次。检测单个样品时, 建议将沉淀改为离心,以便缩短操作时间。
3.4 弃适量上清液,用量筒量取该沉淀液量(每g 被检羊粪便沉淀液为5~10mL ,每g被检牛粪便沉淀液为3~5mL )。
3.5 充分摇匀沉淀液后(肉眼见到粪渣在粪便沉 淀液中均匀即可),用移液管迅速将部分沉淀液移 至“计数器”的两计数室内。
3.6 在显微镜下,观察计数器两计数室内的寄生虫 虫卵,并计数。 3.7 按以下公式计算EPG(每克粪中虫卵数)值。
EPG= 计数器两计数室内的虫卵总数×YmL(粪便沉淀液体积)Xg(粪便重量)×0.2
4 临床印证
用本寄生虫病诊断监测新技术对178 只怀孕绵羊(之前已有3只怀孕绵羊因片形吸虫病死 亡)的片形吸虫病病情程度进行诊断,有26只怀孕绵 羊的片形吸虫虫卵的EPG值在300以上。选用肝蛭 净(Fasinex)治疗这26只绵羊,治疗后第8天检测,17 只怀孕绵羊的片形吸虫虫卵转阴率为100%,其余9 只怀孕绵羊的片形吸虫虫卵EPG值减少率为 86.7% ~96.4% 。在其后5个月的持续观察期内,这178只 怀孕种绵羊中没有一只因片形吸虫病死亡。此结果 表明,应用该寄生虫病诊断监测新技术, 对以往采用 的检测技术检获的EPG较小而危害性大的片形吸 虫病的诊断检测没有发生误诊或漏诊。
5 适用范围
本技术适合于检测诊断几乎所有经 粪便排虫卵或卵囊的寄生虫病,在用于临床诊断中 已经检测出的寄生虫虫卵见表1。 表1 新诊断监测技术的试用情况(略)
6 应用这项新技术检测有关寄生虫虫卵的部分研究报告例举如下。
6.1 Liao Dangjin. Study on the new egg count tech- nique for M. hirudinaceus and A. suum . Veterinary Parasitology, 1996,61:113―117.
6.2 廖党金.绵羊与牛片形吸虫病的粪便检测新技术.中国兽医寄生虫病,2000,8(4):18―22.
6.3 廖党金,张华贵,黄德恩,等.怀孕绵羊片形吸虫病病情程度的诊断和治疗试验.中国兽医杂志, 1999,25(4):17―18.
6.4 骆家锐,徐文福,俄木阿迁,等.绵羊片形吸虫病和线虫病病情程度的检测与治疗试验.中国兽医寄生虫病,2003,11(4):46―48.
6.5 廖党金,向丕元,杨光希,等.规模化养猪的寄生虫病控制技术探讨.四川畜牧兽医,2003,30(增 刊):51―52.
(四川省畜牧科学研究院,成都 610066)
规模化养猪场寄生虫病控制新技术探讨
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