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鲜冻肉的检验程序 编号： 一、检验产品 鲜冻猪肉、牛肉、兔肉、鹅肉、鸭肉、鸡肉 二、使用标准 GB 16869-2005 鲜、冻禽产品 GB 2707-2005 鲜(冻)畜肉卫生标准 GB 4789.1-2010 食品微生物学检验 总则 GB 4789.2-2010 食品微生物学检验 菌落总数测定 GB 4789.3-2010 食品微生物学检验 大肠菌群计数 GB 4789.17-2003 食品卫生微生物学检验　肉与肉制品检验 GB/T 5009.17-2003 食品中总汞的测定方法 GB/T 5009.44-2003 肉与肉制品卫生标准的分析方法 三、检验流程 四、 样品的采取现场采样用品采样箱。带盖搪瓷盘。温度计。编号牌或蜡笔、纸。生肉及脏器检样：如系屠宰场宰后的畜肉，可于开腔后，用无菌刀采取两腿内侧肌肉150（或劈半后采取两侧背最长肌各150)；如系冷藏或售卖之生肉，可用无菌刀取腿肉或其他部位之肌肉250。检样采取后，放灭菌容器内，立即送检；如条件不许可时，最好不超过3，送检样时应注意冷藏，不得加人任何防腐剂。检样送往化检验室应立即检验或放置冰箱暂存。禽类（包括家禽和野禽）：鲜、冻家禽采取整只，放灭菌容器内。带毛野禽可放清洁容器内，立即送检。以下处理同。g（mL）检样中形成的微生物菌落总数。 2. 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： 2.1、恒温培养箱：36 ℃±1 ℃，30 ℃±1 ℃。 2.2、冰箱：2 ℃～5 ℃。 2.3、恒温水浴箱：46 ℃±1 ℃。 2.4、天平：感量为0.1 g。 2.5、均质器。 2.6、无菌吸管：1 mL（具0.01 mL 刻度）、10 mL（具0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头。 2.7、无菌锥形瓶：容量250 mL、500 mL。 2.8、无菌培养皿：直径90 mm。 2.9、PH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。 2.10、放大镜或/和菌落计数器。 3、培养基和试剂 3.1、平板计数琼脂培养基： 3.1.1、成分： 胰蛋白胨5.0g；酵母浸膏2.5g；葡萄糖1.0g；琼脂15.0g；蒸馏水1000 mL；pH 7.0±0.2。 3.1.2制法： 将上述成分加于蒸馏水中，煮沸溶解，调节pH，分装试管或锥形瓶，121℃高压灭菌15min。 3.2、磷酸盐缓冲液 3.2.1、成分： 磷酸二氢钾（KH2PO4）34.0g；蒸馏水500mL；pH 7.2。 3.2.3、制法： 贮存液：称取34.0g的磷酸二氢钾溶于500mL蒸馏水中，用大约175 mL的1 mol/L氢氧化钠溶液调节pH，用蒸馏水稀释至1000mL后贮存于冰箱。 稀释液：取贮存液1.25mL，用蒸馏水稀释至1000mL，分装于适宜容器中，121℃高压灭菌15min。 3.3、无菌生理盐水 3.3.1、成分： 氯化钠8.5g；蒸馏水1000mL 3.3.2、制法“ 称取8.5ｇ氯化钠溶于1000mL蒸馏水中，121℃高压灭菌15 min。 4、检验程序： 5、操作步骤 5.1、样品的稀释 5.1.1、称取25g样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000r/min～10000r/min均质1min～2min，或放入盛有225mL 稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min，制成1:10的样品匀液。 5.1.2、用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10 样品匀液1mL，沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1:100 的样品匀液。 5.1.3 、按5.1.2 操作程序，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1 次1mL无菌吸管或吸头。 5.1.4、根据对样品污染状况的估计，选择2个～3个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10倍递增稀释时，吸取1mL样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。同时，分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。 5.1.5、及时将15mL～20mL 冷却至46℃的平板计数琼脂培养基（可放置于46℃±1℃恒温水浴箱中保温）倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。 5.2、 培养 5.2.1、待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃±1℃培养48 h±2 h。水产品30℃±1℃培养72 h±3 h。 5.2