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实验 显微镜使用方法及植物细胞观察 [目的要求] 1．掌握显微镜的使用方法。 2．掌握临时装片的制作方法。 3．熟悉草酸钙晶体的类型及形态特征。 4．熟悉细胞的基本组成部分。 [材料和用品] 显微投影仪、显微镜、酒精灯、镊子、解剖针、火柴、单面刀片、载玻片、盖玻片、吸水纸、擦镜纸； 水合氯醛、稀甘油、I·IK溶液、蒸馏水 洋葱、马铃薯块茎；甘草、大黄、半夏的粉末 [内容与步骤] 一、显微镜的构造、使用方法及注意事项 1．显微镜的构造： 镜座、镜柱、镜臂、镜筒、粗调螺旋、精调螺旋、目镜、物镜、载物台、反光镜、聚光器。 2．显微镜的使用方法： （1）开始工作前，将显微镜放在桌面上稍左侧，用纱布擦净机械部分，上升聚光器，开大虹彩光圈。 （2）用低倍接物镜，两眼睁开，左眼对准接目镜向下观察，用手转动反光镜，使视野充分照亮为止，此时可放置被检标本片于载物台上，用压夹夹好。 （3）调焦距时，先转动粗调节器，使镜筒缓缓下降，此时必须由侧面细心观察，使物镜头将接近标本片时为止，这时再由目镜观察，同时缓慢转动粗调节器使镜筒上升，直到视野中能看到清晰物象为止。 （4）当视野中出现较清晰物象后。停止调粗螺旋。 （5）如需进行细致观察，可将标本片的目的物移向视野中心，转动转换器以高倍物镜，若物象不清楚，可调细调节器，但绝不能转动粗调节器以避免碰坏玻片损坏镜头。换用高倍镜后视野变暗，可调聚光器及虹彩光圈以增加亮度。 3．使用显微镜的注意事项： ?（1）使用显微镜之前，应按记录卡片，逐项检查零件有无丢失、破损，并作检查签字。 ?（2）取镜时一手握镜臂，另一手托住镜座，不可斜提。 （3）放置时应使镜座轻轻着落，不得使显微镜遭受震动，且只准放在实验台上，不准放在窗台等处。 ?（4）在观察临时制片之前，要认真检查盖玻片外不准有残留试液，以免腐蚀镜头。 图1-1 显微镜的结构 1.目镜 2.镜筒 3.物镜转换器 4.物镜 5.通光孔 6.聚光器 7.光圈 8.反光镜 9.粗调节器?? 10.细调节器 11.镜臂 12.推进器 13.载物台 14.倾斜关节?? 15.镜柱?? 16.镜座?? 17. 照明装置??? 18.粗调限位环凸柄 ?5）用纱布揩拭机械部分，用绸布揩拭光学部分，不可混用或做它用。镜头模糊时可用擦镜纸或绸布沾少许二甲苯轻轻揩拭，如遇到机件失灵或光学部分不正常时，应报告老师解决，严禁擅自拆卸。 （6）实验完毕后，及时撤出标本片，还原各部分，使显微镜完全处于非工作状态。 二、洋葱鳞叶表皮细胞的构造 1．表皮制片：将盖玻片、载玻片擦拭清洁以后、在载玻片中部加一滴蒸馏水，用左手食指与中指夹好叶片、拇指压唯，用刀片划一长形小口，右手持镊子在叶面(上或下面)撕取一层表皮(不带叶肉)，置于载玻片上，用解剖针展平，用镊子持盖玻片使一端接触有水的载玻片，轻放盖玻片于材料上(可免除气泡)，将多余的水用吸水纸吸去，绸布擦净后方可观察 2．植物细胞的基本构造：用镊子撕取洋葱肉质鳞叶内表皮一小块（不要过大），置于载玻片的水滴中（要使光面向上），用解剖针展平，然后加上盖玻片，为了避免发生气泡，用镊子轻轻夹住盖玻片的一边，将另一边与载玻片接触，慢馒放下盖玻片，如水滴不够，应从盖玻片侧面补充一些；如水过多，可用滤纸从盖玻片边缘吸去。置低倍镜下观察，见到物象后再转换高倍镜下仔细观察细胞的形态及结构。可见细胞是长形的，其各部分是无色的。取下载玻片，从盖玻片侧面用滴管滴入少许I·IK溶液，使之扩展到盖玻片的下面。在显微镜下观察。 （1） 细胞壁 是每个细胞的四周壁，此时见到的是细胞的侧壁 （2）细胞质 为无色，透明，具粘滞性的亲水胶体，充满于幼嫩细胞腔中，在成熟的 细胞里则被液胞挤压到紧贴细胞壁。 （3）细胞核 球形(较深)、内有核仁，核可被碘液染成黄色 （4）液泡 略呈肾脏形，可见或不可见。 三、观察细胞后含物之——淀粉粒 取马铃薯中心部分一小块，沾水在载玻片上磨几下，加水一滴，盖片后显微镜下 观察，可见多数单粒淀粉，脐点在一端，降低聚光器，使光线变暗可见层纹、少数复粒和半复粒淀粉，注意与单粒比较有何不同。观察半夏粉末装片与前者有何区别?选较清楚前者绘图，然后从一侧滴入KI-I2试液，观察淀粉粒是否变成紫色？ 四、观察细胞后含物之草酸钙结晶 （1）针晶：取半夏粉末少许用蒸馏水装片，镜检可见块状或分散的针晶，外面常常可见椭圆形的黏液细胞轮廓。 （2）方晶：取黄柏粉末少许，用水合氯醛透化，稀甘油装片，可见含方晶的细胞有分散的，有数个含方晶的薄壁细胞连成一串称晶纤维。 （3）簇晶：取大黄粉末，水合氯醛透化后观察，可见多角形菊花状晶体如许多三棱形结晶的基部愈合而成。 [作业与思考] 1. 绘制3个相邻的洋葱鳞叶表皮细胞图，要求标