环境微生物报告.doc

環境微生物實驗報告 實驗七:直接計數(血球計數法) 組長:鄭名翔4970K036 組員:唐昱祥4970N020 陳裕傑4981N006 曾俊傑4981N008 直接計數(血球計數法) 一 原理 總菌數測定是計算微生物數量的直接方法，可分為直接計數及間接計數二類。其中直接計數器是利用不同的計數器(如Sedgwick-Rafter countingcell、PlalmerMaloney nanoplankton cell、standard medical hemacytometer等)或載玻片(有界線或一般載玻片)在顯微鏡下直接觀察，計算微生物細胞的總數量。此方法優點為方便、快速、節省時間；缺點是無法辨識是否為微生物或只是玻片上看不清楚的黑影，部分微生物未能沉降或為死亡狀態，以肉眼觀察計數的誤差極大。 直接計數的目的為計數並非觀察，所以只須能辦別出菌體即可。 血球計數法 血球計數器為直接計數法中最常用的方法，計數器上凹槽有一邊長1mm的正方形格子，該隔內分為25個大方格(5×5)，每一大方格再細分為16個小方格 (4×4)，因此每小格子的邊長為0.05mm(=1÷5÷4)。在高度方面，蓋上蓋玻片後，玻片與計數器的間距恰好為0.1mm，故每小格的體積等於0.00025mm3(=0.052×0.1)。 實驗時滴入菌液蓋上蓋玻片(22mm×22mm)，使菌液充滿計數器凹槽中，接著以顯微鏡觀察計算小方格內菌體數量，即可求得單位體積樣品之總數(個/ml或個/cm3)。 血球計數盤 　　規格：　 　　計數池深度：0.100mm　 　　計數池劃格：1mmX1mm　 　　白血球計數大方格：1／16mm2　 　　紅血球計數中方格：1／mm2　 　　紅血球小方格：1／400mm2　 　　載玻片尺寸：74×33×5（mm）　 　　應用：主要用以計算人體內紅、白血球數量。也可用於一些場合的細胞計數。 七.心得 裕傑：這次的實驗很難，直接計數法，應該說比較麻煩，要做的步驟蠻多的，做到後面還要用顯微鏡算個數，總共要算16格裡的菌數，我剛開始看的時候，嚇一跳...怎麼會有一大團...那要怎麼算...，後來才知道那個可以不用算，16格平均每格大概100個菌數，好累！ 俊傑：這次的實驗劇之前觀察 都弄到下課還在弄，所以有心理準備了，但是卻很順利的完成每個步驟，除了數菌拖了點時間以外沒什麼大礙。這次的實驗一開始差點就錯了，還好有注意到同學一開始就加錯試劑，不然我想我們這次的實驗就完蛋了吧。 昱祥: 這個實驗我覺得我學的很糢糊像血球計數我真的不知道要算什麼，它有分一大格有二十五中格有十六小格到底要算小格還是中格還是大格？？ 名翔 :血球計數法就是觀測血球的部份，這的確蠻有意思的醫學上也會用到血球計數，所以我們討論了血球計數是用來做什麼的，得知了很棒的訊息可以用來診斷貧血、發炎…等症狀，那在做實驗時就是比較麻煩要一個一個計數眼睛會眼花的，那如果拿血液來計數不知道會是什麼樣的情形，不知道能否診斷以上所講的症狀，那如果可以的話這樣就可以檢查血液啦!我想阿因該會要更專業的吧!沒接觸過醫學所以不太清楚。