OPA-紫外测定方法【DOC精选】.docVIP

紫外分光光度法测定消毒剂中邻苯二醛的含量 田佩瑶 李洁 李长青 (北京市疾病预防控制中心, 北京 100013) 2003年7月，北京终于赢得了抗击“非典”的胜利，这中间消毒工作起了非常重要的作用。许多新型消毒剂应运而生。为了规范和管理消毒剂市场，需要建立相应的消毒剂检测方法，以适应市场的需求。 邻苯二醛（OPA）是国内外近年来研究出的一种新型化学消毒剂。它无刺激性，无毒性，腐蚀性低，使用浓度低，作用时间短，具有与戊二醛相同的杀灭微生物的能力，是一种很好的戊二醛的替代品，具有良好的应用前景。目前，美国已将其列入了消毒剂序列，并已形成了消毒灭菌常用参数。我国也已开始研制此类消毒剂。为了准确检测此类产品中OPA含量，保证消毒剂的质量，根据OPA分子中的醛基具有紫外吸收的特点，我们建立了紫外分光光度法测定消毒剂中OPA含量的方法。该法灵敏、快速，通过对实际样品的测 定，结果另人满意。 1．实验： 1.1仪器与试剂： 1.2方法： 1.2.1工作曲线制备： 准确称取OPA标准品0.1000g，用去离子水定容至100ml容量瓶中，配成OPA标准储备液,浓度为1.0mg/ml。 准确移取0.0、1.0、3.0、5.0、7.0、10.0ml的OPA标准储备液于100ml容量瓶中,用去离子水定容至刻度，配成浓度为0.0、10.0、30.0、50.0、70.0、100.0μg/ml标准系列。 1.2.2样品制备与测定： 准确移取1.0ml样品于100ml容量瓶中,用去离子水定容至刻度。在仪器最佳条件下，测定标准系列，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制工作曲线。同时测定样品及空白溶液吸光度值，用工作曲线计算，得到所对应的样品浓度。 1.2.3仪器最佳条件： 波长：260.0nm； 测定因子：1.0；纸速：50nm/cm； 光源：UV+VIS灯； 扫描速度：240nm/min； 测量方式：吸光度A； 最大吸光度：1.000A； 最小吸光度：1.000A；响应时间：1s； 2.结果： 2.1溶剂的选择及最大吸收波长的确定： OPA成品是一种淡黄色针状结晶，能溶于水、醇、醚等。我们分别用去离子水、甲醇、乙醇做溶剂，配置100μg/ml OPA溶液，在220 nm - 350nm扫描，结果见图1。 从图中可以看到，三种溶剂扫描出的OPA吸收峰均另人满意，去离子水配OPA灵敏度最高，因此，选择去离子水为溶剂。同时，通过样品扫描比对，确定260 nm为分析波长。见图2。 2.2线性范围、工作曲线： OPA在5-200μg/ml范围内服从朗伯比尔定律，曲线相关系数r=0.9999，根据样品含量范围，选择10-100μg/ml作为工作曲线。 2.3OPA稳定性： 2.3.1封装OPA标准品50、200μg/ml两个浓度的安瓿若干件，分别做54℃14d和37℃90d (n=6)存放实验。 2.3.2含OPA消毒剂样品3件，按原包装分别做54℃14d和37℃90d存放实验。 2.3.3标准和样品的含量测定按1.2的方法进行。 结果，对两种温度条件存放后测得标准的结果与标准值(见表1)做样本均数与总体均数比较的t检验,[2] P0.05，两条件下所得结果与标准浓度值无显著性差异。对两种温度条件存放后测得样品的结果与当天测定结果(见表2)做配对设计的差值均数与总体均数比较的t检验,[2] P0.05，两条件下所得结果与当天测定结果无显著性差异。 以上结果表明，稳定性实验后，标准和样品中OPA的含量值没有明显降低，与文献报道的同样条件下抑菌效果不降低[3]结论一致，说明OPA在稳定性方面具有十分突出的优点。 表1 标准溶液在不同温度下放置后的含量(n=6) 标准浓度 54℃14 d 37℃90 d μg/ml μg/ml μg/ml 50.0 50.2 49.5 200.0 198.9 200.1 表2 样品在不同温度下放置前后的含量比较（%，g/g）(n=6) 样品 配方值 当天检测OPA含量 54℃14 d 37℃90 d 样1 0.30 0.29 0.29 0.30 样2 0.25 0.25 0.26 0.25 样3 0.70 0.70 0.70 0.71 2.4方法的精密度、回收率： 对某样品重复测定7次，相对标准偏差RSD=1.5%，对不同浓度的样品，分别加入高浓度50μg/ml、低浓度10μg/ml的标准，测得回收率为90%～110%，达到方法的要求。见表3。 表3. 回收率实验 样品号 本底值（μg/ml） 加标浓度（μg/ml） 测得值（μg/ml） 回收率（%） 加标浓度（μg/ml） 测得值（μg/ml） 回收率（%）