第九章吸光光度法.pptVIP

第九章 比色分析和分光光度法 9－1 吸光光度法的基本原理 9－2 光度计及其基本部件 9－3 显色反应及显色条件的选择 9－4 吸光度测量条件的选择 9－5吸光光度法的应用 通过比较溶液颜色的深浅确定溶液浓度的方法称为比色分析法。 吸光光度法的特点 灵敏度高 测定物质微量组分(1-10－3％)的常用方法，通常分光光度法所测试液的浓度下限可达10－5 - 10－6mol/L， 相当于0.001-0.0001%含量。 准确度较高 一般比色分析的相对误差为5-10%，分光光度法为2-5%，如采用精密的分光光度计测量，相对误差可减少至1-2%。 操作简便、快速、仪器设备较为简单 9－1 吸光光度法的基本原理 1、物质对光的选择性吸收 当光束照射到物质上时，光与物质之间发生相互作用，因而产生反射、散射、吸收、透射四种现象。 若被照射溶液是一均匀体系，散射损失可忽略不计，则： 波长：400～760nm 可见光 ＜ 400nm 紫外光 ＞ 760nm 红外光 我们日常所见的白光为混合光，它由红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等各种色光按一定比例混合而成，其波长在可见光的范围之内。 若两种颜色的光按某适当强度混合后可成为白光，这两种光色称为互补色。 溶液之所以呈现出不同的颜色，是由于物质对光具有选择吸收所造成的。如： 全部可见光被吸收，溶液呈黑色； 可见光吸收很少，溶液呈无色； 吸收可见光中某一颜色光，溶液呈现该颜色的补色。如： 硫酸铜吸收白光中黄光，故呈现蓝色。黄色和蓝色互为补色。 表9－1 物质颜色与吸收光颜色的互补关系 由以上分析可见： 吸收光与透射光是一对互补色光，吸收光与透射光可以组成白光。 在可见光区，不同波长光呈现不同颜色，溶液颜色是由透射光波长决定的。 吸收曲线作用 对物质进行定性分析 不同物质，吸收曲线的形状和最大吸收波长不同，根据该特性，可对物质进行初步定性分析。 选择测定波长 不同浓度的同一物质，在吸收高峰附近，吸光度随浓度增大而增加，但最大吸收波长并不改变，因此，吸收曲线是选择吸收波长的重要依据。 Ⅰ：Fe2+含量为0.0002mg/ mL Ⅱ：Fe2+含量为0.0004mg/mL Ⅲ： Fe2+含量为0.0006mg/mL 由图可见： 溶液的吸收高峰随溶液浓度的增加而增大，但不同浓度溶液出现吸收高峰时的波长未发生变化，因此测Fe2+时可将波长置于510nm处； 溶液对波长600nm以上的光吸收很少，能完全透过，所以溶液显橙色。 物质呈色的原因是对光选择性吸收的结果，溶液显出的是透射光的颜色。 2、光的吸收定律 （1）朗白－比尔定律 实验证明：如果保持入射光波长不变，溶液对光的吸收程度与溶液浓度、液层厚度成正比。 关于ε的讨论 ε在数值上等于浓度为1mol/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度，是吸光物质吸光能力的标志。 ε越大比色测定的灵敏度越高。 ε 105：超高灵敏； ε=(6～10）×104 ：高灵敏； ε2×104 ：不灵敏。 入射光波长、溶液性质、温度一定时， ε为一常数。 [例1]铁(II)浓度为5×10-4g·L-1的溶液，与  1,10-邻二氮杂菲反应，生成橙红色络合物。该络合物在波长508nm，比色皿厚度为2cm时，测得A=0.19。计算1,10-邻二氮杂菲亚铁的a及ε。 [解]已知：b＝2cm；A ＝ 0.19； C＝ 5×10-4g·L-1 ；M＝55.85 g·mol-1 在多组分体系中，若各种吸光物质之间无相互作用，体系的总吸光度等于各组分吸光度之和： 3、偏离比尔定律的原因 标准曲线法测定未知溶液的浓度时，标准曲线常发生弯曲，尤其当溶液浓度较高时，引起这种偏离的因素为物理因素、化学因素两类。 物理因素 朗白－比尔定律的基本假设条件是入射光为单色光，而仪器提供的入射光是波长范围较窄的光带组成的复合光，物质对不同波长光的吸收程度不同。 9－2 光度计及其基本部件 3、比色皿 比色皿由无色透明耐腐蚀的玻璃制成，用于盛放比色溶液，一般为长方形，有厚度为0.5cm、1cm、2cm、3cm几种规格。同样厚度比色皿之间的透光率相差应小于0.5％。 比色皿应保持十分干净，尤其要保护它的透光面，不要用手直接触摸。 4、检测系统 光电检测器－将光强度转换为电流。有光 电管、光电二极管阵列 读数装置－毫伏表。现代仪器常与计算机