高效液相色谱法1实验目的了解并掌握高效液相色谱法的分离原理学习并.pptVIP

实验三 芳香族化合物的定性、定量分析—高效液相色谱法 1 实验目的 了解并掌握高效液相色谱法的分离原理 学习并掌握高效液相色谱仪的操作 掌握保留时间初步定性和外标法的定量方法 学习使用Empower Pro中文版色谱工作站处理数据 2 实验原理和仪器结构 2.1 高效液相色谱法分离原理 高效液相分配色谱法有反相或正相色谱法两种分离模式。反相高效液相色谱法是指采用非极性固定相（如C18等）、极性溶剂（如甲醇等）作为流动相的一种分离模式。正相色谱法与反相色谱法相反，它是以极性固定相（如带有氨基和氰基的固定相），非极性溶剂（正己烷等）为流动相的一种液相色谱分离模式。极性较强或亲水的样品分子和反相柱中的固定相上的相互作用较弱，分配较少，因此随着流动相较快流出，反之，疏水性相对较强的分子和固定相间存在较强的相互作用，在柱内保留的时间相对较长。 HPLC分离的机理 2.2 仪器流程 3 实验仪器设备、试剂、溶液和实验用品 3.1 仪器 高效液相色谱仪：美国WATERS 600高压泵，WATERS 2996型二极管阵列检测器和Rheodyne 7725i六通阀进样器；Empower Pro中文版色谱工作站；BS210S型电子分析天平；100 μL微量进样器。 3.2 试剂与样品 甲醇（99.9 %）：色谱纯；水：二级水；苯（