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（一）氧化酶试验： 实验原理：奈瑟菌等产生氧化酶，能将盐酸二甲基对本二胺或盐酸四甲基对苯二胺氧化成有色的醌类化合物。 方法：用白色滤纸条沾取被检菌落，滴加10克/L盐酸二甲苯对本二胺试剂1滴于滤纸条的菌落上，立即观察结果。 结果判断、解释和报告：立刻出现红色，继而逐渐加深为紫红色为阳性，（如加盐酸四甲基对苯二胺试剂，呈蓝紫色为阳性）。不变色为阴性。氧化酶试验阳性是奈瑟菌属的共同特征。 滴加10克/L盐酸二甲苯对苯二胺 菌落 逐渐 试验结果： 阳性 逐渐 菌落 （二）触酶试验; 原理：触酶又称过氧化氢酶，具有过氧化氢酶的细菌，能催化过氧化氢成为水和原子态氧，继而形成氧分子，出现气泡。 方法：取洁净玻片1张，用接种环挑取细菌，加3%H2O2 1滴，立即观察结果。 试验结果：阳性 （三）葡萄糖、麦芽糖、蔗糖发酵试验: (+) (四)KIA试验：只分解GLU，不分解其他糖类。 （五）硝酸盐还原试验：（阴性） （六）IMViC： 　　　 吲哚IDN + 　　　　　　 甲基红MR + 　　　　　　　 VP - 　　　　　　 枸橼酸盐CRT - （七）MIU： 　　动力MOT + 　　　　 吲哚IND + 　　　　脲酶URE　＋ 药敏试验： 对壮观酶素、青霉素、四环素敏感性较高，对头孢类、环丙沙星类有一定的耐药性 三 结果报告： 1、尿沉淀涂片镜检时，普通细菌根据形态及染色性，报告“找到革兰×性××细菌“。如见到革兰阴性双球菌、肾形、存在于细胞内（外），报告”找到革兰阴性双球菌，存在于细胞内（外），形似淋病奈瑟菌“；见到革兰阳性、卵圆形的 芽生孢子和管状假菌丝，报告”找到酵母样细菌，形似白假丝酵母菌“；抗酸染色见到抗酸阳性杆菌，可报告”找到抗酸杆菌“。 2、尿液细菌计数革兰阳性细菌大于10^4CFU/ml、革兰阴性杆菌大于10^5CFU/ml有诊断意义。分离培养后，立即进行微生物学鉴定及标准化的药敏实验，最后报告“检出ⅹⅹ细菌”，并报告药敏实验结果。 3、培养48小时仍无细菌生长者，报告“48小时培养无细菌生长”。 报告： 检出“淋病奈瑟菌” 药敏结果：对壮观酶素、青霉素、四环素敏感性较高，对头孢类、环丙沙星类有一定的耐药性 终报告：小晋得急性淋病 尿液标本的细菌学检验 案例 小晋，男，30岁，是一家公司的经理，常常和朋友或客户去酒吧喝酒。一次在酒吧，喝酒时结识了一位女性，那晚他们便去酒店开了房。大约五天后，小晋发现了身上的不对劲，自觉尿痛、尿频。还出现了尿道口红肿，尿道粘液性分泌物增多，尿道口流脓等症状。请问患者是哪种细菌感染？如何进一步鉴定？ 一 标本采集： 1 采集方法： 最好留取早晨清洁中段尿标本。首先用肥皂水清洗会阴部及尿道口，在用清水冲洗，嘱患者排弃前段尿液，收集中段尿10-20ml 直接排入专用的无菌容器中，加盖立即送检。 2.标本运送与保存：尿液标本采集后应立即送检、及时接种，室温下保存时间不能超过2小时，4℃冷藏时间不能超过8小时，否则尿液细菌迅速繁殖，使尿中细菌计数不准确。但疑为淋病奈瑟菌感染患者的标本不能冷藏保存。 3 注意事项： （1）．采集尿液标本应在使用抗菌药物之前进行，防止药物对细菌的抑菌作用。 （2）．应取清晨第一次尿液送检。 （3）．尿液采集应严格进行无菌操作，防止污染。 （4）．标本采集后立即送检，一般不超过1h。否则由于细菌的繁殖影响结果的正确性。 （5）．应注意不要让外阴消毒剂混入标本，引起抑菌后果。 细菌学检验： 检验程序： 检验方法： （一）涂片法 1．一般细菌涂片 以无菌操作取尿液10ml左右放入无菌试管中，经3 000r/min离心l5min，弃去上清液，取沉渣涂片，进行革兰染色，如发现革兰阳性或革兰阴性菌，可根据细菌的染色性和形态，做出初级报告。 2．疑为假丝酵母菌 取尿液离心沉淀物置于清洁玻片上，加盖玻片后用高倍镜观察，若沉渣太多，可滴加10％左右的NaOH，使沉渣溶解后再镜检，或制成涂片革兰染色油镜检查，如发现革兰阳性卵圆形芽生孢子或假菌丝，即可做出初级报告。 3．疑为淋病奈瑟菌 取尿液沉淀物置于清洁玻片上，制成涂片，革兰染色，油镜检查，如发现革兰阴性双球菌，呈肾型，存在于细胞内或细胞外，即可做出初级报告。 4．疑为结核分枝杆菌 取尿液l0ml左右经3 000r/min离心30min，取沉渣涂片，进行萋一纳及潘本汉染色，若两种涂片均查见红色杆菌，即报告“找到结核分枝杆菌”，如萋-纳染色找到红色杆菌，而潘本汉染色中未发现红色杆菌，则为耻垢分枝杆菌，也可用全胺“o”