高效液相色谱结果分析第二讲.pptVIP

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高效液相色谱结果分析第二讲

高效液相色谱 一.色谱数据处理 三.色谱图名词术语(1) 三.色谱图名词术语(2) 三.液相色谱图名词术语(3) 三.液相色谱图名词术语(4) 三.液相色谱图名词术语(5) 三.液相色谱图名词术语(6) 三.液相色谱图名词术语(7) 三.液相色谱图名词术语(8) 1.确定色谱条件: 色谱柱的选择,流动相、流速、检测波长、柱温及进样量S等。 2.绘制标准工作曲线 3.精密度试验与回收率试验 4.实际样品含量测定 * * 结果处理与分析 第二部分 (High performance Liquid Chromatography,HPLC) Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 一、色谱数据处理 二、色谱图 三、色谱图名词术语 四、色谱峰检测 五、HPLC测定步骤与内容 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 检测器 记录仪 积分仪 色谱工作站 色谱仪信号输出图 色谱数据处理是通过ADC转换器,把模拟信号转换成数字信号,然后采用色谱软件处理给出色谱图等信息。 数据处理原理 自动处理 人工修正 峰的检测 数据采集 基线校正和重叠峰的分离 数据处理方法 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 色谱柱流出物通过检测器时所产生的响应信号对时间的曲线图, 其纵坐标为信号强度, 横坐标为时间 二.色谱图 (Chromatogram) 样品组分分离示意图 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 色谱峰(Peak):色谱柱流出组分通过检测器时产生的响应信号. 峰底(Peak Base):峰的起点与终点之间连接的直线. 峰高(Peak Height):峰最大值到峰底的距离. ←色谱峰 时间(分) 峰高 峰底 响应值 (mV) 基线 ↓ Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 切线峰宽(Peak Width, 峰宽):在峰两侧拐点处所作切线与峰底相交两点之间的距离. 半峰宽(Peak Width at Half Height):通过峰高的中点作平行于峰底的直线,此直线与峰两侧相交两点之间的距离 . 峰面积(Peak Area):峰与峰底之间的面积,又称响应值. 色谱峰的判断 (最小面积) 响应值 时间 峰面积 切线 半峰宽 切线峰宽 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 保留时间(TR)(Retention time): 组分从进样到出峰最大值所需的时间. 死时间(t0)(Dead time): 不被固定相滞留组分的出峰时间.(其测定测定通常是使用不被柱子保留而又有紫外吸收的惰性物质,例如:正相色谱常用四氯化碳,反相色谱常用甲醇、尿嘧啶、NaNO3等). 调整保留时间:tR’= tR-t0 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 保留体积(VR)(Retention volume): 组分从进样到出现峰最大值所需的流动相体积. 死体积(V0)(Dead volume): 不被固定相滞留的组分, 从进样到出现峰最大值所需的流动相体积. 调整保留体积:VR’=VR-V0=tR’ ? FC Fc: 流动相的流速 mL/min. Evaluation only. Created with Aspo

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