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冰冻亚型红细胞信息库的建立及应用 　　[摘要] 目的 探讨冰冻亚型红细胞信息库的建立及应用，以利于冰冻亚型红细胞的合理选择和应用。 方法 以甘油作为防冻剂，将ABO亚型红细胞进行甘油化和适当分装后，于-80℃低温冰箱冰冻保存；同时详细记录每份红细胞的来源、亚型种类、弱抗原与抗血清的反应强度、红细胞容量、预期用途、分装容器、分装总份数、每份分装量、血浆是否含ABO不规则抗体、是否保存对应血浆以及献血码或姓名、性别、年龄、民族、身份证号码、通讯地址、联系电话等资料，建立冰冻亚型红细胞信息库；根据不同工作需要，从红细胞信息库中选择合适的亚型红细胞，经融化洗涤，加入合适的保存介质和抑菌剂后使用。 结果 从冰冻亚型红细胞信息库中选择合适的亚型标本，在血站和医院供血库ABO血型鉴定相关工作中应用后，无偿献血者和医院患者的ABO亚型检出率显著提高，进一步保证了临床输血的安全性和有效性。 结论 ABO亚型红细胞的冰冻保存及其信息库的建立，能使ABO亚型红细胞得到充分有效的利用，具有良好的经济效益和社会效益，可在采供血机构和医院供血库进行推广应用。 　　[关键词] 信息库；红细胞；冰冻；ABO亚型 　　[中图分类号] R331.1+41 [文献标识码] B [文章编号] 1674-4721（2014）07（b）-0187-04 　　ABO亚型是指在常见的人类A、B、O、AB 4种血型之下进一步细分的ABO血型[1]，如A血型的A2、Aint、A3、AX、Aend、Am、Ay、Ael等，B血型的B3、BX、Bend、Bm、Bel等，AB血型的A2B、A3B、AB3、AXB、ABX、AmB、ABm、cisAB、B（A）等，这些亚型是由于基因突变导致的红细胞抗原减弱[2]。在血型血清学试验中，ABO亚型由于红细胞A、B抗原减弱或血浆中同时含有ABO不规则抗体，极易因漏检和误判而导致严重的输血不良反应，给安全输血带来极大隐患[3-8]。因此，正确鉴定献血者和临床患者中存在的ABO亚型，在保证临床输血安全方面具有十分重要的意义。2010年以来，笔者利用冰冻保存RhD阴性血液的原理，将日常工作中确定为亚型的血液和标本进行冰冻保存，建立了冰冻亚型红细胞信息库，并在血站和医院供血库ABO血型鉴定相关工作中得到了一定范围的应用，有效提高了无偿献血者和临床患者的ABO亚型检出率，进一步保证了临床输血安全。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　2010年1月～2013年12月，进行冰冻保存的ABO亚型血液和标本，16份来自本站无偿献血者血液（其中包括2010年以前献血时被确定为正常血型，2010年以后重复献血时被确定为亚型的4名无偿献血者血液），15份来自临床供血库送检的患者标本，14份是家系调查标本。 　　1.2 初始血液和标本的选择条件 　　所有进行冰冻保存的血液和标本均被确定为ABO亚型，采集时间6 d，无溶血和脂血，HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP等传染性指标检测均为阴性。 　　1.3 方法 　　1.3.1 亚型红细胞的冰冻保存 　　从医院患者或家系调查获得的小容量ABO亚型标本，按文献[9]的方法用注射器和真空采血管进行甘油化，分装后保存于-80℃低温冰箱。被确定为亚型的无偿献血者血液，用Cryafugedessi型大容量低温离心机（德国贺利氏公司），按RCF 1600×g离心10 min，或1280×g离心18 min，分离出浓缩红细胞，使红细胞压积控制在0.75±0.05[10]，然后称取需要甘油化红细胞的重量，按终浓度40%[11]计算甘油添加量，用COBE2991TM1型血细胞淘洗机（美国COBE血液技术公司）进行甘油化，甘油的添加速度控制在8～10 ml/min，震荡频率控制在90～100次/min，添加完毕静止平衡30 min，以RCF 1250×g离心10 min，去除多余的水分和甘油，使甘油化红细胞的压积控制在0.60±0.05[11]。分装后于-80℃低温冰箱冰冻保存。分离出的血浆根据需要选择性保存于-30℃低温冰箱。 　　1.3.2 冰冻亚型红细胞信息库的建立 　　上述所有进行冰冻保存的ABO亚型红细胞，均详细记录每份红细胞的来源、亚型种类、弱抗原与抗血清的反应强度、红细胞容量、预期用途、分装容器、分装总份数、每份分装量、血浆是否含ABO不规则抗体、是否保存对应血浆以及献血码或姓名、性别、年龄、民族、身份证号码、通讯地址、联系电话等资料，从而建立冰冻亚型红细胞信息库。目前，冰冻亚型红细胞信息库中，分门别类冰冻保存的ABO亚型红细胞共有45例，其中A2 3例，A2B 3例，A3 2例，B3 2例，Ax 3例，BX 4例，Bend 2例，AXB 3例，ABx 6例，Am 1例，Bm