病理实验技术.doc

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病理实验技术

1.图像的定性分析:指用肉眼、显微镜、电镜等观察图像结构后对图像的结构特点和含意所作的描述、分析、推理和判断。 2.图像的定量分析:是指用量化的方法、以数字的表达形式对图像中各种结构信息的定量描述,及在此基础上对图像含意所作的定量分析、推理、判断和概括。 3.数值图像:是指把图像画面划分成由数字化的像素集所构成的图像。各像素像的灰度值用整数值来表示。因此所谓数值图像就是像素灰度值的二维数组。 4.形态测量学:也称形态测试学,是指定量测试和分析组织宏观或微观水平的二维和三维的形状与结构的原理、方法及其应用的一门科学,它通过有关量化指标反映组织的结构特点。包括平面测量学与体视学。 6.几何校正:是将一标准尺度输入计算机图像分析系统,计算机根据该尺度就可确定出在该标准尺度输入的条件下有关图像的尺度单位,即图像中每一像素所代表的实际尺寸,这一过程通常称为标定。标准尺度主要有以下三种形式,宏观标准尺度、显微标准尺度和超微标准尺度。 7.光密度校正:也称光密度标定,它是将一套标准的光密度片通过显微镜和(或)摄像机输人图像分析系统并以此为标准对光密度参数进行校正。 8.计算机图像分析:指用计算机图像分析系统对图像结构的定量测试,以及在此基础上对图像的定量描述、理解、识别和分类。 9.吸光度 A(曾称光密度OD)是指光线通过溶液或某一物质前的人射光强度与该光线通过溶液或物质后的透射光强度几比值的对数,即:A=㏒(I0 / Ib) 10.积分吸光度(IA)就是指一定范围内(如核内)各像素吸光度值之和 11流式细胞术(flow cytomertry, FCM):流式细胞术是利用流式细胞仪进行的一种单细胞定量分析和分选技术;是单克隆抗体及免疫细胞化学技术、激光和电子计算机科学等高度发展及综合利用的高技术产物;具有速度快、精度高、准确性好等优点,成为当代最先进的细胞定量分析技术。 12.基因芯片:又称DNA芯片(DNAcMp),是指固着在固相载体上的高密度的DNA 微点阵。具体地说就是将大量靶基因或寡核背酸片段有序地,高密度地 排列在如硅片、玻璃片、聚丙烯或尼龙膜等载体上,这就是基因芯片。基因芯片按功能可分为三类:表达谱基因芯片、诊断芯片和检测芯片。 13.组织芯片:又称组织微阵列;是将数十个至数百个小的组织片整齐地排列在某一载休上而成的微缩组织切片;组织芯片的制作主要包括组织筛选和定位,阵列蜡块的制作和切片等步骤。 14.超薄切片:由于电镜电子束穿透能力的限制,必须把标本切成厚度小于0.1um以下的薄片才适用,这种薄片称为超薄切片。常用的超薄切片厚度是50-70nm。 15.进行性染色:又称渐进性染色,将组织成分着色自浅至深,当达到所需要的强度时,终止染色,这种方法称为进行性染色。 16.退行性染色:又称后退性染色,现将组织浓染过度,使其超过所需要的程度,然后再用某些溶液脱去多余的染色剂,以达到适当的深度,并使不着色的组织、细胞的某些成分脱去色度,而最终使应该着色部分达到适宜程度。 17.分化:就是用某些试剂,将过度染色的或不需要着色的组织成分上的颜色除去个过程。 18. 蓝化:是指用明矾苏木素液深染细胞核后,通过盐酸乙醇分化,切片从酸性环境中转移至流水中使之变蓝的过程。 19.原位分子杂交:用已知碱基顺序并带有标记物的核酸探针与组织、细胞中待测的核酸按碱基配对的原则进行特异性结合,形成杂交体,然后再用与标记物对应的检测系统,通过组织化学或免疫组织化学方法在核酸原有位置进行细胞内定位。 20抗原修复:组织在制作过程中,由于化学试剂的作用封闭了抗原,又由于热的作用致使部分抗原的肽链发生扭曲,致使在免疫组化的染色过程中不能将其显示出来,为了解决上述的问题,利用化学试剂和热的作用将这些抗原重新暴露出来或修正过来的过程称为抗原修复是一小段单链DNA或者RNA片段,用于检测与其互补的核酸序列—取材—固定—洗涤—脱水—透明—浸蜡—包埋—切片—烤片—脱蜡—染色—脱水—透明—封固。 27.切片封片染色后封片的好处:(1)与外界隔绝,不会有灰尘落入;(2)不会发生霉变;(3)不会氧化;(4)折光,便于观察;(5)水分不易挥发。 28.核酸探针的种类:1)根据探针的核酸性质不同:DNA探针、RNA探针、cDNA探针、cRNA探针、寡核苷酸探针;2)根据探针的标记方法不同:A放射性探针:32P、3H、35S;B非放射性探针:生物素标记、地高辛标记、荧光标记。 29.原位杂交的基本原理:当溶液中的DNA分子经高温或高PH处理后,DNA双链分子会变性产生两条单链,如果将温度逐渐下降或PH恢复到中性,单链会按照碱基互补配对的原则,重新形成氢键恢复到原来的双链结构。如果两条单链的来源不同,只要它们之间的碱基顺序同源互补或者部分同源互补,在条件适宜时,就可以全部或部分复

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