第三章发育毒性和胚胎毒性课题.ppt

4.在一定剂量下，既不呈现母体毒性，也未见致畸作用 应在动物可能耐受条件下，最大限度地增加剂量，使其远远高于人类或其它动物实际可能接触的水平，如仍未出现致畸作用，才可做出结论。 母体毒性与致畸作用的剂量关系之间，并无固定比值；一般情况下，致畸作用剂量较母体毒性作用剂量为低 第六节 发育毒性和致畸作用  试验与评价 一、一般生殖毒性试验 为FDA提出的“三段试验”中的I段：雌雄性交配前分别给药14天和60天 (分别相当于卵子和精子发育的一个多周期),雌鼠受孕后继续给药至器官发生期末,孕期20天处死孕鼠,剖腹检查子宫和胎鼠.研究对成年雌雄性生殖功能、配子的发生及成熟、交配行为、受精、着床前的发育和着床的影响。 二、 传统常规致畸试验（致畸试验） 相当于美国FDA致畸和繁殖毒性三阶段试验的第二段(phase II)； 传统致畸试验是评价孕体在胚胎发育期(器官形成期)接触受检物的有害影响。 致畸作用是发育毒性中最重要的一种表现，所以外来化合物发育毒性的评定，主要是通过致畸试验； 在致畸试验中除可观察到出生幼仔畸形外，也可同时发现生长发育迟缓和胚胎致死； 传统常规致畸试验是评定外源化学物是否具有致畸作用的标准方法。 试验设计 动物选择 剂量和分组 给药时期 给药途径 其他 (一)动物选择 1.选择动物原则 最好能符合以下标准 (1)胎盘的结构和功能尽可能与人或其它生产实践中的动物一致 (2)妊娠过程较短、每窝产仔数较多 (3)自发畸形率低 2.选择动物的种类 致畸试验通常选用两种哺乳动物 一种是啮齿类，一般首先考虑大鼠，其次是小鼠；另一种是家兔 雌性用性成熟的，未交配过的动物 3.动物数量 每组动物数足以对实验数据进行有意义的解释 对大鼠、小鼠，一般是每个剂量组用16-20只； 家兔，一般是每个剂量组用8-12只； 对较大的动物，如狗、灵长类动物，则每组动物数可少些。 (二)剂量和分组 应最少设3个剂量组，另设对照组 最高剂量组：可以引起母体轻度中毒，即进食量减少、体重减轻、死亡不超过10%； 最低剂量组：不应观察到任何中毒症状； 中间剂量组：可以允许母体出现某些极轻微中毒症状。其剂量与高剂量和低剂量成等比级数关系。 亚急性毒性试验的最大耐受剂量作为致畸试验的最高剂量，以其1/30为最低剂量 以LD50的1/2-1/3为最高剂量，LD50的1/30-1/50为最低剂量 人体或实践中动物实际接触量 可供剂量设计参考的数据有3方面： (三)给药时期 给药时期的正确与否是致畸试验成败的关键之一。不同物种的动物，器官形成期不同。给药时期应包括器官形成期的主要阶段。 孕 d29 孕 d28 孕 d20 处死期 孕 d6～ d18 孕 d6～ d15 孕 d7～ d16 染毒期 孕 d7～ d8 孕 d5～ d6 孕 d4～ d5 着床期 成年未交配过 60d～ 90d 90d～ 120d 交配 兔 小鼠 大鼠 致畸试验日程 (四)给药途径 原则上是依据受检物的性质及人类和其它动物可能接触的方式等情况而定，可经呼吸道、经口、经皮、腹腔注射或静脉注射等 致畸试验，一般应在春秋两季进行。因为在这两个季节气候比较适宜，动物受孕率较高，其他季节在保持恒温和光线适宜的标准动物房内合笼，受孕率也可能较高。 (五)其他 六、观察指标 外观检查：头部、躯干部和四肢 骨骼检查：茜素红染色，囟门大小，头骨、脊柱骨、四 肢骨、肋骨、胸骨等 内脏检查：Bouins液固定2周后检查 取出子宫，称取子宫、胎盘和活胎的重量，记录黄体数、着床数、活胎数、死胎数及吸收胎数（大鼠和家兔） （七）结果分析与评价 畸胎总数：每一活产幼仔出现一种或一种以上畸形均作为一个畸胎 ； 畸形总数：在同一幼仔每出现一种畸形，即作为一个畸形；如出现二种或二个畸形，则作为二个畸形计，并依此类推； 计算时还要对剂量效应（反应）关系加以分析。 * 第三章 生殖发育毒性作用（Reproductive and Developmental Toxicity ） 第一节 生殖毒性 生殖毒性（reproduction toxicity） 是指对雄性和雌性生殖功能的损害和对后代的影响。故包括对父母双方和对胚胎/胎儿、新生儿的损害。 1.外源化学物对雄性生殖系统的损害 对雄性生殖系统的直接影响 棉酚、重金属、有机氯杀虫剂、有机磷杀虫剂、杀线虫剂和工业污染物 干扰睾丸的功能及结构。 对内分泌功能的影响 干扰下丘脑－垂体－睾丸轴的正常功能，主要影响促性腺释放激素的释放。