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二、真核生物的细胞分化 1.玉米胚胎发育遗传控制的研究 玉米的胚胎发育,可以人为地分为三个阶段。第一阶段是合子第一次分裂,不对称地形成一个较大的顶端细胞,和一个液泡化的、较小的基细胞,胚和胚柄的差别趋向明显。第二阶段是子叶出现,胚轴、顶端生长点和胚根形成。第三阶段是营养器官健全,茎节、幼叶发生。 1991-1993年,Sheridan和 Clark从玉米中分离到胚胎发育阻断的51个突变体。经过研究,发现它们的发育阻断分别发生在不同的发育阶段。这样,就获得了有价值的实验材料,可用于研究玉米胚胎发育过程先后受哪些基因的控制,它们分别具有何种DNA序列,在何种条件下转录合成mRNA,进而合成何种蛋白质,这些蛋白质各起何种作用。 2.花药和花粉发育遗传控制的研究 (1)早在1980-1984年,Kamalay和 Goldberg就比较过花和营养器官的mRNA,发现大约有10000种mRNA是花药特异性的,它们的表达在营养器官中检测不到,认为是这些mRNA决定和保持了花药组织的细胞分化状态。 但到了1993年,McCormick和 Goldberg才发现在花药特异性表达的若干基因,它们所编码的蛋白质,分别有脂转移蛋白、蛋白酶抑制剂和多种酶。 (2)1990年,Mascarenhas将花粉形成过程中的基因表达分为早、晚两个时期。早期表达的转录产物在减数分裂后即可检测到,而在成熟花粉中减少或完全消失。晚期表达的转录产物最早发生在小孢子有丝分裂时期,并且随着花粉的成熟而继续积累。 因此一般认为,早期表达的基因可能编码细胞骨架蛋白,和参与细胞壁形成、淀粉积累的蛋白质;晚期表达的基因则编码在花粉成熟和萌发时起作用的蛋白质。 事实上,近几年来也分离到了属于早期表达的基因,和晚期表达的基因,前者如油菜的I3cDNA克隆,后者如油菜的Bp10基因、烟草的NTP303基因和番茄的LAT51基因等。 三、表达调控的应用前景 1.使某种基因只在生物的特定器官表达 已经成功地利用特异性启动子,使转基因羊只在乳腺表达人凝血因子或а抗胰蛋白酶,以便从羊奶中提取药物,用于治疗贫血症或肺气肿。 我国首例转а-1抗胰蛋白酶基因羊 2.通过诱导特定基因表达,获得某种组织或器官 正在研究如何在体外培养干细胞,使其分化为特定的细胞(例如造血干细胞)或组织(例如皮肤),以满足病人自体细胞移植或组织修复的需要。 体外培养干细胞的过程 通过分别离体培养来自子叶、子叶节、生长点、种子苗、原球茎、花被、花药等的体细胞,在培养基上直接产生了各种植物的花器官或花芽。这些植物包括大豆、蚕豆、番茄、黄瓜、山楂、荞麦、春兰、水仙、康乃馨等。离体培养棉花胚珠,在培养基上直接产生棉花纤维。离体培养海巴戟、长春花、洋紫苏等植物的体细胞,分别得到了各种生物碱、利血平、阿吗灵等次生化合物。为将来实现植物产品的工厂化生产展示了诱人的前景。 棉花纤维 棉线 康乃馨 各种生物碱产品 长春花 3.应用植物生长调节剂控制各种作物的 生长发育。 已经证实,正确应用不同的调节剂,能够分别收到发根、催芽、整形、开花、坐果、催熟、保鲜,乃至提高产品品质和产量等效果。这种新技术称为“化学调控”。 * * 果蝇唾腺细胞疏松区实图 * * * * 长春花 * 第十三章 基因的表达调控 基因调控:控制特定基因产物合成机制 在生物体内每个细胞都会有同样的遗传密码,但它的表达却是“各取所需”。 基因是在特定的细胞和时间表达遗传信息 第一节 原核生物基因的表达调控 一、转录水平的调控 二、翻译水平的调控 转录水平 翻译水平 DNA mRNA 蛋白质 一、原核生物基因的转录调控 可诱导的操纵子:加入对基因表达有调节作用的物质后,开启基因的转录活性。如乳糖操纵子。 可阻遏的操纵子:加入对基因表达有调节作用的物质后,关闭基因的转录活性。如色氨酸操纵子。 (一)大肠杆菌的乳糖操纵子 1.乳糖操纵子基本结构 lacI代表乳糖操纵子的阻遏蛋白基因; P代表乳糖操纵子的启动子区域; O代表乳糖操纵子的阻遏蛋白结合区域; lacZ代表β-半乳糖苷酶基因;lacY代表半乳糖苷透性酶基因;lacA代表半乳糖苷转乙酰酶基因。 LacI LacZ LacY LacA P/O 2. 乳糖操纵子的负调控 在培养基中没有乳糖的情况下,阻遏蛋白四聚体与结构基因上游的O紧密结合,从而阻止RNA聚合酶的通过,使得与乳糖代谢相关的3个结构基因不能被转录。 而当培养基中加入乳糖后,在诱导物的作用下阻遏蛋白的结构发生改变,从而使阻遏蛋白从结合位点O脱离,RNA聚合酶得以在3个结构基因的转录中
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