第六章原核生物基因表达调控课题.ppt

原核生物主要是在转录水平上调控基因的表达。 当需要某种基因产物时，就大量合成这种mRNA，当不需要这种基因产物时就抑制这种mRNA的转录，就是让相应的基因不表达。 通常所说的基因不表达，并不是说这个基因就完全不转录为mRNA，而是转录的水平很低，维持在一个基础水平（本底水平）。 基因表达完全关闭的情况使极为少见的。 原核生物中基因的组织形式 几个作用相关的基因在染色体上串连排列在一起，由同一个调控系统来控制。 这样的一个整体称为一个操纵元(operon)。 乳糖操纵元的负调控 Cyclic AMP ATP在腺苷酸环化酶的作用下转变成环式AMP(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)。 cAmp-CAP Catabolite activating protein, CAP 代谢激活蛋白，是cAmp的受体蛋白 (cyclic Amp receptor protein, CRP) cAmp-CAP复合物，是lac操纵元的正调控因子 乳糖操纵元的正调控 5、 协调调节 当阻遏蛋白封闭转录时，CAP对该系统不能发挥作用； 如无CAP存在，即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合，操纵子 仍无转录活性。 单纯乳糖存在时，细菌利用乳糖作碳源； 若有葡萄糖或葡萄糖/乳糖共同存在时，细菌首先利用葡萄糖。 mRNA 低半乳糖时 高半乳糖时 葡萄糖低 cAMP浓度高 葡萄糖高cAMP浓度低 RNA-pol O O O O (二) 乳糖操纵子的影响因子 1、lac操纵子的本底水平表达 乳糖 因为诱导物需要穿过细胞膜才能与阻遏物结合，而运转诱导物需要透过酶。 在非诱导状态下有少量（1-5个mRNA分子）lac mRNA合成--本底水平组成型合成。 lac操纵子的本底水平表达 3、阻遏物lacI基因产物及功能 mRNA 阻遏蛋白 I DNA Z Y A O P pol 阻遏基因 弱启动子控制的组成型合成 4、葡萄糖对lac操纵子的影响 葡萄糖 腺苷酸环化酶活性降低 ATP 无法转变成 cAMP 不能形成 CAP-cAMP 复合蛋白 RNA 酶无法结合在 DNA 上 结构基因不表达。 代谢物阻遏效应 研究认为葡萄糖的某些降解产物抑制lac mRNA的合成，这种效应称之为代谢物阻遏效应. 葡萄糖效应 5、cAMP与代谢物激活蛋白 Catabolite gene activation protein site -10 site -35 site CACCCCAGGCTTTACACTTTATGCTTCCGGCTCGTATGTTGTGTGGAATTGAGCGGA TAACAATTTCACAC CTCATTAGG ACTCGATTGAGTGTAATTA 5’ 3’ Operon region 20bp RNA polymerase binding region or promoter region Primary structure of lac operon regulation region 5’ TATAAT 3’ Pribnow box UUUU…… 3 4 UUUU 3’ 3 4 核糖体 前导肽 前导mRNA 1.当色氨酸浓度高时 转录衰减机制 1 2 5’ trp 密码子 衰减子结构 就是终止子 可使转录 前导DNA UUUU 3’ RNA聚合酶 终止 UUUU…… 3 4 2 4 2 3 UUUU…… 核糖体 前导肽 前导mRNA 1 5’ trp 密码子 结构基因 前导DNA RNA聚合酶 2.当色氨酸浓度低时 Trp合成酶系相关 结构基因被转录 序列3、4不能形成衰减子结构 三、降解物对基因活性的调节 1、葡萄糖效应（降解物抑制作用） 是指当葡萄糖和其它糖类一起作为细菌的碳源时葡萄糖总是优先被利用，葡萄糖的存在阻止了其它糖类的利用的现象。 2、降解物对基因活性的调节 葡萄糖通过降低cAMP的含量而抑制基因表达 四、细菌的应急反应 指细菌在恶劣生长环境中关闭tRNA和核糖体形成的能力。 1、细菌的应急反应 2、细菌的应急反应的机制 应急信号： 鸟苷四磷酸（ppGpp）、 鸟苷五磷酸（pppGpp） 诱导物：空载tRNA 焦磷酸转移酶 第二节 乳糖操纵子与负控诱导系统 一、乳糖操纵子(lac operon)的结构与组成 调控区 阻遏基因 启动子 操纵基因 结构基因 Z： β-半乳糖苷酶 Y： 透酶 A：乙酰基转移酶 Z Y A O P DNA I 启 动 子