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关于禽类间充质干细胞的研究：探索与前景 　　0 引言 　　Introduction间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)是中胚层发育的早期细胞，是一类具备干细胞基本特性的成体干细胞。在发育的不同阶段和特定环境条件下，间充质干细胞可向骨、软骨、肌肉、神经、血管及血液细胞等多种方向分化。20世纪70年代Friedenstein等首次在人骨髓中分离出成纤维样的骨髓间充质干细胞，并证明这种细胞具有多潜能发育能力。间充质干细胞易于体外培养，扩增迅速，可以分化为多种细胞，具有巨大的临床应用价值和科学研究价值。间充质干细胞的研究大部分集中在人及大鼠、小鼠这两种模式动物上，近些年兔、猪、马和羊等其他动物来源间充质干细胞的研究也相继展开。但禽类间充质干细胞的研究远远滞后于哺乳动物，21世纪以来人们开始陆陆续续的研究禽类间充质干细胞，目前已实现了禽类间充质干细胞体外的非分化增殖。鸡作为一个已揭示了众多胚胎发育机制的生物模型，可用于胚胎学、免疫学、肿瘤学、细胞生物学、病毒学、基因调控等研究。本文对禽类间充质干细胞的来源、分离培养、鉴定及分化等方面的最新研究进展作一综述。 　　1 资料和方法Data and methods 　　1.1 资料来源 　　由第一作者通过计算机检索1990至2014年PubMed和中国知网数据库收录的与禽类间充质干细胞有关的文献。英文检索词为“mesenchymalstem cells ，poultry ， chicken ， isolation ， culture，differentiation”，中文检索词为“间充质细胞，禽类，鸡，分离培养，分化”。 　　1.2 入选标准 　　纳入标准：有关禽类间充质干细胞来源、分离、纯化、培养和诱导分化的文献。文献内容相关程度高，具有原创性，且观点明确，论据可靠。排除标准: 内容陈旧、重复性文章。 　　1.3 文献质量评估 　　共检索到113篇文献，阅读标题与摘要进行筛选，排除与此文无关的文献，最后共纳入42篇文献。文献类型包括实验研究和综述文献。 　　2 结果Results 　　2.1 禽类间充质干细胞的来源 　　间充质干细胞来源广泛，骨髓、脂肪、皮肤、羊膜、卵黄囊等组织中均能分离到间充质干细胞。 　　2.1.1 骨髓来源的间充质干细胞骨髓由3种细胞系统组成：造血系统、内皮系统和基质系统。这3种细胞系统皆存在造血干细胞、内皮祖细胞和间充质干细胞。其中骨髓间充质干细胞具有向多种中胚层和神经外胚层组织细胞分化的能力。Cohnheim等在1867年通过实验推测骨髓内存在非造血功能的干细胞。Caphan把这些具有一定黏附能力，在体外能高度扩增、并可多向分化的干细胞群命名为间充质干细胞。2009年Mahesh从1-14 d龄的鸡骨髓中分离到间充质干细胞，这些间充质干细胞能在体外很好的培养、增殖和分化。Bai等和李双星等相继于2013年和2014年获得北京油鸡和罗曼鹤鸡的骨髓间充质干细胞。Li等从1 d龄鸭骨髓中获得了鸭的骨髓间充质干细胞，并进行了长期的体外培养。大量研究表明骨髓间充质干细胞具备易于分离培养、增殖纯化、多次传代扩增后仍具有干细胞特性、免疫原性低、体外基因转染率高并能在宿主体内长期存活等优点。 　　2.1.2 脂肪组织来源的间充质干细胞脂肪间充质干细胞不仅来源丰富、取材方便，而且同骨髓间充质干细胞有着相似的生物学特性及类似的免疫表型，引起了国内外研究者的广泛关注。2001年Zuk等分离获得了人的脂肪源间充质干细胞。禽类的脂肪间充质干细胞研究相对少，2011年Gong等从1 d龄鸡皮下脂肪组织中首次分离到鸡的脂肪间充质干细胞，唐小洪等于2014年建立鸡的脂肪源间充质干细胞的分离与鉴定方法。这些间充质干细胞表达CD29、CD44及CD71等表型，不表达造血干细胞表面标志CD45、CD34，并具有向脂肪细胞、成骨细胞分化的能力。 　　2.1.3 皮肤来源的间充质干细胞随着从骨髓、胎盘、脐带和骨骼肌等组织中分离间充质干细胞的研究日益广泛，人们开始从皮肤组织中分离间充质干细胞。杨立业等从小鼠的皮肤组织中分离到原代的皮肤间充质干细胞，这些细胞多次传代后仍具有形态均一、体外增殖迅速等特征和向成骨细胞、脂肪细胞和神经元样细胞分化的潜能。Gao等从16 d龄鸡的背侧皮肤组织中分离到能表达CD29、CD44及CD71等表面标志和具有成骨、成脂和成神经组织分化能力的鸡皮肤间充质干细胞。 　　2.1.4 脐带Wharton#39;s Jelly 来源的间充质干细胞1991 年Mcelreavey 等首次从人脐带的WhartonsJelly中分离培