基因工程的基本操作程序导学案2.docVIP

专题一 基因工程 1.2基因工程的基本操作程序 【学习目标】1．理解基因工程的原理 2．简述基因工程基本步骤的几个步骤 【学习重点】基因工程的基本操作步骤 【基础回扣】 转录……U－U－A－G－A－U－A－C－U ……这mRNA上DNA复制： 场所：_________________模板：_________________原料：_______________________ 酶： 原则： 结果：_______________________ 默写出中心法则： 【预习导学】 一、目的基因的获取 1、目的基因：符合人们需要的，编码蛋白质的 。 2、获取目的基因的方法 （1）从基因文库中获取目的基因 ①基因文库：将含有某种生物不同基因的许多_________，导入受体菌的群体中______，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。 基因组文库：含有一种生物的_______基因 ②种类 cDNA文库：含有一种生物的 ____基因（cDNA是反转录获得的双链DNA） ③目的基因的获取 根据基因的有关信息：基因的___________序列、基因在___________上的位置、基因的_________产物mRNA、基因的_________产物蛋白质等特性获取目的基因。 （2）利用PCR技术扩增目的基因。 ①PCR：是一项在生物体外________特定DNA片段的核酸合成技术。 ②条件：已知目的基因的_____________序列。 ③过程：第一步：加热至90～95℃ DNA解链为 ；第二步：冷却到55～60℃， 与两条单链DNA结合；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始进行 的合成。 ④方式：指数扩增=2n(n为扩增循环的次数) （3）人工合成法：基因较小，核苷酸序列已知，可以人工合成。 二、 基因载体农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。[来源: ] （2）基因枪法 基因枪法：是_______植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高。 （3）花粉管通道法 花粉管通道法：这是我国科学家独创的一种方法，是一种十分简便经济的方法。（我国的________________就是用此获得的） 2、将目的基因导入动物细胞 （1）方法：________注射技术。 （2）操作程序：目的基因表达载体________→取卵(受精卵) →显微注射→注射了目的基因的受精卵移植到雌性动物的________________内发育→新性状动物。 3、将目的基因导人微生物细胞：Ca2＋处理法。首先将细胞用 处理，成为 。接下来将重组表达载体DNA分子与受体细胞在 中混合，促进感受态细胞 完成转化过程。 （三）受体细胞： 1、植物细胞作受体细胞时，可以选用体细胞和 细胞，当选择体细胞作受体细胞时，可以通过 方式实现细胞的全能性。 2、动物细胞作受体细胞时，只能选择 细胞。 3、微生物作受体细胞，是利用原核生物的 特点。 四、 ①首先要检测 ②其次还要检测 ③最后检测［例1］下列有关基因工程技术的正确叙述是 A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快 D．只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达 ［例2］应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到探测疾病的目的。基因探针是指A．用于检测疾病的医疗器械B．用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子 C．合成β—球蛋白的DNAD．合成苯丙羟化酶DNA片段 、构建基因组DNA文库时，首先分离细胞的 A、染色体DNA?? B、线粒体DNA?? C、总mRNA?? D、tRNA??( ) A.540个 B.8100个 C.17280个 D.7560个 2．在基因工程中，科学家常用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，原因是（ ） A.