专题：微生物的培养与应用.pptVIP

（一）筛选菌株 自然界筛选：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。(如耐高温的TaqDNA聚合酶) 实验室筛选：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。 选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。 测定微生物数量的方法： 1、直接计数法：最常用的显微镜直接计数。 先将待测样品制成悬液，然后取 一定量的悬液放在显微镜下进行计数。根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微生物总数。 优点：设备简单、能观察微生物的形态特征。 缺点：不能区分死菌和活菌； 难以计数微小的细菌。 一般用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。 2、间接计数法：最常用稀释涂布平板计数法 应用：统计样品中活菌的数目 ②操作：第一位同学只涂布了一个平板，没有设置重复组，因此结果不具有说服力。 第二位同学考虑到设置重复组的问题，涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另2个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，因此，不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。 阅读教材22-23页小字部分并帮A同学解决问题 A同学的结果与其他同学不同，可能的解释有两种：一是由于土样不同，二是由于培养基污染或操作失误。究竟是哪个原因，可以通过实验来证明。 1.原理：尿素是一种重要的农业氮肥，只有当土壤中 的 细菌将尿素分解成氨之后，才能 被植物利用。尿素细菌能合成脲酶，在脲酶的作用下尿素被分解成氨。 CO(NH2)2+H2O CO2+2NH3 （2）实验设计的内容包括实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。 （3）实验流程： 土壤取样 样品系列稀释 涂布平板与培养 观察并记录结果  4.能排除培养基是否有杂菌污染的方法是 A.将未接种的培养基放在实验桌上培养 B.将未接种的培养基放在窗台上培养 C.将未接种的培养基放在恒温箱中培养 D.将已接种的培养基放在恒温箱中培养 5.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出（ ） A.固氮细菌 B.霉菌 C.放线菌 D. 大肠杆菌 * * 专题2 :微生物的培养与应用 广东省惠东中学 武发菊 1.在培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是是什么物质？ 碳源是葡萄糖，氮源是尿素。 2.分析该配方的培养基对微生物是否具有筛选作用？如果有，又是如何进行筛选的？ 能分解尿素的细菌的筛选 阅读教材22页左上角的培养基配方，并思考回答下列问题： 有筛选作用，它的氮源只含有尿素，只有能利用尿素为氮源（合成分解尿素的脲酶）的细菌才能生长。 （二）统计菌落数目 ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的 一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 （注意）：一般选择菌落数在30-300的平板 进行记数。 a、设置重复组：增强实验的说服力和准确性。将待测样品经过一系列的稀释，选择三个稀释度的菌液均匀涂布在平板上，然后培养。 （注意）：为了结果接近真实值，可将同一稀释度菌液涂布到3个或3个以上的平板上，经培养，计算出菌落的平均数。 实验方案有两种：一种方案是可以由其他同学用与A同学一样的土样进行实验，如果结果与A同学一致，则证明A无误；如果结果不同，则证明A同学存在操作失误或培养基的配制有问题。另一种方案是将A同学配