第四节常用培养基的配方及其特点.pptVIP

（五）SH培养基 SH培养基是1972年由Schenk和Hidebrandt设计的。它的主要特点是与B5相似，不用（NH4）2SO4，改用NH4H2PO4，是矿质盐浓度较高的培养基。在不少单子叶和双子叶植物上使用效果很好。 （六）Miller培养基 Miller培养基与MS培养基比较，无机元素用量减少1/3-1/2，微量元素种类减少，无肌醇。 第五 节 培养基的选择 培养基＝基本培养基 ＋ 植物激素 （物质基础 ） （调控手段） 生存 ←→ 发展 培养基的选择在实质上讲就是设计营养物质与激素（种类、用量）的最佳组合，实现离体细胞的生长、分化与植株再生。而最佳组合的结论作出，需研制培养基配方并试验其效果。 在建立一个新的实验体系时，为了能研制出一种适合的培养基，最好先由一种已被广泛使用的基本培养基(如Ms培养基或B5培养基)开始。当通过一系列的实验，对这种培养基的物质种类、用量、比例关系作出适当调整后，即有可能得到一种能满足实验需要的新培养基。 选择合适的培养基是植物组织培养成功的基础。选择合适的培养基主要从以下两个方面考虑：一是基本培养基；二是各种激素的浓度及相对比例。 MS培养基适合于大多数双子叶植物，B5和N6培养基适合与许多单子叶植物，特别是N6培养基对禾本科植物小麦、水稻等很有效，White培养基适合于根的培养。 首先试用这些培养基进行初步实验，可以少走弯路，大大减少时间、人力和物力的消耗。当通过一系列初试之后，可再根据实际情况对其中的某些成分做小范围调整。 在进行调整时，以下情况可供参考: 一是当用一种化合物作为氮源时，硝酸盐的作用比铵盐好，但单独使用硝酸盐会使培养基的PH向碱性方向漂移，若同时加入硝酸盐和少量铵盐，会使这种漂移得到克服。 二是当某些元素供应不足时，培养的植物会表现出一些症状，可根据症状加以调整， 如氮不足时，培养的组织常表现出花色苷的颜色（红、紫红色），愈伤组织内部很难看到导管分子的分化； 当氮、钾或磷不足时，细胞会明显过度生长，形成一些十分蓬松，甚至呈透明状的愈伤组织； 铁、硫缺少时组织会失绿，细胞分裂停滞，愈伤组织出现褐色衰老症状； 缺硼时细胞分裂趋势缓慢，过度伸长；缺少锰或钼时细胞生长受到影响。 培养基外源激素的作用也会使培养物出现上述一些类似的情况，所以应仔细分析，不可轻易下结论。 激素浓度和相对比例的确定 组织培养中对培养物影响最大的是外源激素，在基本培养基确定之后，实验中要大量进行的工作是用不同种类的激素进行浓度和各种激素间相互比例的配合试验。在实验中，首先应参考已有的报道，看是否有用相同植物、相同组织或相近者做过成功或失败的试验，如果有则可直接作为参考； 如果没有，则在建立激素配比中，将每一种拟使用的激素选择3-5个水平，再按随机组合的方式建立起如下的实验方案。 两种激素4种浓度的组合试验 第二次激素配比实验 一般来说，经过这次实验就可能选出一种适合于你的实验材料的培养基，或许不是最好的，但结果是可靠的。在此基础上可进行培养基中其他成分的变动实验，如可变动蔗糖浓度、琼脂用量、培养基的PH或添加某些氨基酸等。但必须掌握一个原则，就是要有理有据，特别是对一些宝贵的植物培养材料，更要慎之有慎。 选择最佳培养基，常用试验方法主要有单因子试验、多因子试验及广谱实验等。 一、单因子试验 在试验中，培养基中其他成分都维持在一般水平上，只变动一个因子，通过试验可以找出这一因子对试验的影响和影响的程度。这种只研究一个因素的试验就是单因子试验。 例：以MS为基本培养基，分别对BA和NAA作单因子分析： MS＋BA2＋NAAm （0、0.1、0.5、1.0） MS+BAn+NAA0.1 （0、 0.5、1.0、2.0） 局限性：探索范围难于把握，不能反映各种单因子成分之间的组合效果与相互影响。 生物学试验不同于物理学或化学试验，最显著的差别是在生物学试验中必需设置对照组与试验组，试验组可以有一组或几组，随试验的复杂性而设置，对照组也可能有一组以上。试验中要求对照组与试验组中的试验个体，即植物组织块或其他培养物，必须在遗传性、生理状态、前培养条件等方面，尽可能完全一致。以保证试验结果是来源于试验因子，而不是由于试验材料的不一致导致的。 试验中各处理一般都要设有一定的重复，以取得可靠的试验结果。随试验规模和要求不同，大多每个项目要有4-10瓶，每瓶至少3块培养物或3丛小幼苗。 二、多因子试验 对培养基中两个或两个以上因素进行研究的试验称为多因子实验。试验可采用完全试验方案，也可选用正