PCR技术侯云鹏课件.pptVIP

TaqMan探针 5’ 5’ 3’ 3’ d.NTPs Taq酶 Primers 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 反应体系 变 性 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ Taq l 5’ 3’ R Q Probe 5’ 3’ R Q 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ R Q 退 火 5’ 3’ 1. 链取代 Taq 3’ Q R 5’ 5’ 3’ 3’ Q Taq R 5’ 2. 水 解 3. 聚 合 5’ 3’ Q Taq R 3’ 5’ 4. 检测荧光 5’ 3’ 3’ Q Taq R 5’ l TaqMan探针的设计原则 Tm大于引物Tm10℃ 5’末端不能是G 5’ 5’ 3’ 3’ d.NTPs Taq酶 Primers 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 反应组分 分子信标(Molecular Beacons) 变 性 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ Taq 5’ 3’ R Q R Q Molecular Beacon 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 1. 链替换 Taq 5’ 2. 聚合完成 l 5’ 3’ R Q 退 火 5’ 3’ R Q