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PCR出现假阴性原因分析及解决方案 模板因素： （1）模板中含有杂蛋白； （2）模板中含有Taq酶抑制剂； （3）模板中蛋白质残留， 特别是染色体中的组蛋 白残留； （4）提取制备模板时丢失过多； （5）模板核酸变性不彻底。 PCR出现假阴性原因分析及解决方案 模板因素引起假阴性解决方案： 1.配制有效而稳定的消化处理液； 2.提取程序固定,不宜随意改动； 3.模板DNA的溶解液应固定不变。 PCR出现假阴性原因分析及解决方案 酶失活： 1.酶本身的质量问题(供应商的问题）； 2.酶存放时间太长； 3.酶存放方式不当，或其他意外原因； 4.忘记添加Taq酶。 PCR出现假阴性原因分析及解决方案 酶失活引起假阴性解决方案： 1.检查加样程序及过程，看是否忘记加Taq酶； 2.更换新的Taq酶; 3.新旧两种Taq酶同时使用。 PCR出现假阴性原因分析及解决方案 引物： 1.引物质量； 2.引物浓度； 3.两条引物的浓度是否对称等。 PCR出现假阴性原因分析及解决方案 引物引起假阴性解决方案: 1.选定一个好的引物合成单位; 2.引物浓度不仅要看OD值，稀释时更要平衡其摩尔浓度； 3.引物应高浓度小量分装保存，防止反复冻融或长期冷冻保存，导致引物的变质降解失效，也可要求合成单位将固体分装； 4.引物设计不合理，如长度不够，引物本身或两条引物之间形成二聚体等。 PCR