上海交通大学遗传学上午6组果蝇杂交实验技术分析.pptx

果蝇杂交实验方案 汇报人：谢思骏、黄柏如、 黎宇航、杨文斌 1.实验的目的： 1.1 验证基因伴性遗传 的规律 1.2 验证基因连锁与交 换规律并计算重组值 　　　　 1.目的 黑腹果蝇， Drosophila melanogaster 1 黑腹果蝇生活史 2 黑腹果蝇的饲养方法 3 研究的性状及显隐性 4 2.实验材料： 黑腹果蝇也称黑尾果蝇（学名：Drosophila melanogaster），是被人类研究得最彻底的生物之一，为模式生物。其名字源于它喜好腐烂的水果以及发酵的果汁 黑腹果蝇 黑腹果蝇 科学分类： 界： 动物界 Animalia 门： 节肢动物门 Arthropoda 纲： 昆虫纲 Insecta 亚纲： 有翅亚纲 Pterygota 目： 双翅目 Diptera 科： 果蝇科 Drosophilidae 属： 果蝇属 Drosophila 种： 黑腹果蝇 D. melanogaster 第一季度 单击编辑副标题 性别鉴别 1 黑腹果蝇雌性体长2.5毫米, 雄性较之要小。雄性腹部有黑斑 (black patch), 前肢有性梳 (sexcombs)，而雌性没有, 可以此来作区别。 第一季度 单击编辑副标题 突变形状鉴别 1 黑腹果蝇生活史 2 果蝇的生活周期长短与温度有密切的关系。 雌蝇可以一次产下5个0.5毫米大小的卵，总共约400个。它们有绒毛膜和一层卵黄膜包被，其发育速度受环境温度影响。 ? 10°C 15°C 20°C 25°C 卵→幼虫 ? 57天 ? 18天 8天 5天 幼虫→成虫 6天 4天 生活周期长短与饲养温度的关系 黑腹果蝇生活史 2 果蝇在25°C，从卵到成蝇需要十天左右，成虫可活26~33天。果蝇生活史如下图： 黑腹果蝇的饲养方法 3 果蝇以酵母菌为主要食料，凡能发酵的基质都可做为果蝇饲料。实验室里主要用玉米。 原种每2-4周换一次培养基，看到幼虫后就将成虫赶去。各品系之间避免杂交 研究的形状及显隐性 4 本次的研究 野生型黑腹果蝇： 红眼、长翅、直刚毛（++、++、++） 突变型黑腹果蝇： 白眼、小翅、卷刚毛（ww、mm、snsn） 亲本的纯种培养 1 遗传式 2 果蝇杂交 3 3.实验技术流程 P ♀XwXw X ♂XWY ↓ F1 ♀XWXw X ♂XwY ↓ F2 ♀ 0.25 XWXw：0.25 XwXw：♂0.25XWY：0.25 XwY 遗传式-伴性遗传 P ♀wmsn/wmsn X ♂+++/Y ↓ F1 ♀wmsn/+++ X ♂wmsn/Y ↓ F2 待测 遗传式——连锁与交换 亲本的纯种培养 1 伴性遗传的观察 2 伴性遗传的进一步观察 3 连锁与交换的观察 4 2.实验步骤 亲本的纯种培养——亲本饲养瓶的准备 a. 饲料配制： 根据上表，取应加水量的一半，加入琼脂，煮沸，待充分溶解后加糖煮沸溶解 取另一半水混合玉米粉，加热，调成糊状。 将上述两者混合，煮沸。 待稍冷后加入酵母粉及丙酸，充分调匀分装。 ? 水/ml 琼脂/g 蔗糖/g 玉米粉/g 酵母粉/g 丙酸/ml 玉米饲料 200 1.5 13 17 1.4 1 亲本的纯种培养——亲本饲养瓶的准备 b．饲料瓶的准备 取中型指管，以纱布包的棉花球做瓶塞。消毒后加入饲料，冷却后用酒精棉花擦拭内壁，插入消毒过的吸水纸作为幼虫化蛹的干燥场所。 亲本的纯种培养——亲本饲养瓶的准备 c. 亲代果蝇挑选 将两个品系的果蝇麻醉后挑选外观完整健康的野生型果蝇4对，突变型8对，扫入准备好的饲养瓶中培养。 雌雄果蝇的区分：在肉眼看来,雄果蝇的尾部有黑点,较尖.雌果蝇的没有,是白的,较圆显微镜下雄果蝇的第一对腹肢上有性梳,和梳子长得很像。 亲本的纯种培养——果蝇的麻醉与转瓶 先将长有果蝇的培养瓶在海绵垫上敲，使之全部震落在培养瓶底，然后迅速打开培养瓶塞，将果蝇倒入去盖的麻醉瓶中，然后立即塞上棉塞。稍微打开棉塞，并在其上滴加2~3滴乙醚。待呈昏迷状态（附肢收缩，双翅紧贴背部）后将其倒到干净的滤纸上观察。 观察过程中如若果蝇醒来则可滴几滴乙醚于滤纸上（不可直接滴在果蝇上），用麻醉皿立即扣住复苏的果蝇，数秒钟后继续观察。 观