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一、实验目的 1. 练习分离果蝇幼虫唾腺的技术,学习唾腺染色体的制片方法 2. 观察了解果蝇唾腺染色体的形态学及遗传学特征 二、实验原理 果蝇是双翅目昆虫,幼虫期具有很大的唾腺细胞,其中的染色体是巨大的唾液腺染色体 唾液腺染色体不断地进行自我复制而不分开,经过许多次的复制形成约1000~4000拷贝的染色体丝,合起来达5mm宽,400mm长,比普通中期相染色体大得多(约100~150倍),所以又称为多线染色体 唾液腺染色体具有许多重要特征,为遗传学研究的许多方面,如染色体结构、化学组成、基因差别表达等提供了独特的研究材料 三、实验材料与器具 三龄幼虫 0.9%生理盐水 胭脂红染色液 解剖镜 解剖针 吸水纸 四、实验步骤(1) 四、实验步骤(2) (2)染色: 吸去生理盐水,注意操作时要边观察边吸湿,最好用解剖针轻压,防止连同唾腺一起吸走;滴加胭脂红染色液,染色20-30min (3)压片: 染色完成后,盖上干净的盖片,并覆一层滤纸。将片子放在实验台上,用大拇指均匀用力压片。(注意不要使盖片移动。) 五、注意事项 1. 一定加生理盐水,否则唾腺易干。 2. 将脂肪组织清除干净 3. 水不可太多,否则幼虫会漂浮而且活跃 4. 染色时间不可过长,否则背景也着色 5. 压片时要逐渐加力,用力要均匀 6. 染色完以后,将旧的染色液吸去,加新的染色液,再压片 7. 吸水时勿将唾腺一起吸走 六、实验结果观察 检查你制作的制片,寻找形态良好、分散适中的图象仔细观察各条臂的特点。 画出所制染色体的形态,大小,并标出明显的横纹特点。 * * 动物遗传学实验 实验四 果蝇唾腺染色体的 制备和观察 (1)剥离唾腺 在一干净的载玻片上滴一滴生理盐水,选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫,或者选择经低温处理的果蝇三龄幼虫置于载玻片上。 每只手各持一个解剖针,在解剖镜下进行操作。果蝇的唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处,左手持解剖针按压住虫体后端三分之一的部位,固定幼虫,右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位,适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。 唾腺是一对透明的棒状腺体,外有白色的脂肪组织(不透明)。去除幼虫其它组织部分,并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。 果蝇唾腺剥离示意图 *
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