实验一中和剂的选择.pptVIP

实验一　中和剂的选择 一　教学要求 　　了解中和剂的作用、类型及选择方法。 二　实验原理 　　某些有机或无机化合物与消毒剂作用后不仅能及时终止消毒剂的杀灭微生物作用，且这些化合物本身及其与消毒剂的反应产物对微生物无抑制或杀灭作用，对培养基亦无不良影响。在进行消毒实验时，这些化合物可作为中和剂用来终止消毒剂杀菌作用，以便能准确获得消毒剂在一定时间内的杀菌结果。 　　某一种消毒剂要用什么化合物中和，需要经过实验选择。 实验时，将拟选择的中和剂样品加入测定管（该管含消毒剂和指示菌并已作用一定时间）中，经充分中和作用后，取样测定含菌数，测定结果与对照组的测定结果进行比较后，即可确定那种试剂可用作该消毒剂的中和剂。 三　实验材料与器材 器材：恒温培养箱，菌落计数器，电热恒温水浴锅，平皿（直径9cm）、锥形烧瓶、量筒、无菌刻度吸管（1.0，5.0，10.0mL）。 指示菌：大肠杆菌（8099或ATCC 25922），枯草杆菌黑色变种（ATCC 9372）芽胞。 四 实验步骤 1、大肠杆菌菌悬液的制备 经活化过的大肠杆菌菌种转接于营养琼脂培养基斜面，37℃下培养24h。 加入5mL 无菌PBS洗下菌苔。 用无菌脱脂棉过滤。 经过滤的菌液用PBS稀释成含菌量为5×105~5×106cfu/mL的菌悬液。 2、芽胞悬液的制备 经活化过的枯草杆菌黑色变种菌种转接于营养琼脂培养基斜面， 37℃下