细菌特殊耐药表型检测一、β内酰胺酶的检测产β内酰胺酶是导致细菌.doc

细菌特殊耐药表型检测 β内酰胺酶的检测 产β内酰胺酶是导致细菌对β内酰胺类抗生素耐药的主要原因，其中尤以超广谱β内酰胺酶和染色体或质粒介导的Ampc酶以及近年来出现的碳青霉烯酶最为重要。 青霉素酶的检测：显色头孢菌素法是目前临床实验室检测青霉素酶最常用的方法之一。其原理是受试菌产生的青霉素酶水解头孢硝噻吩分子结构中的β内酰胺环，产生由黄色向红色转变的颜色反应，即为青霉素酶试验阳性。 操作步骤：将受试菌直接涂布于经无菌水湿润后的头孢硝噻吩纸片上，观察颜色反应，产生红色者为青霉素酶检测结果阳性。如下图所示 2．超广 谱β内酰胺酶（ESBLs）的检测： ESBLs是一类在广谱酶TEM、SHV的酶基因发生1~5个以上核苷酸的点突变衍化而来的系列酶，可同时水解青霉素类、头孢菌素类以及单环类的氨曲南的活性可被酶抑制剂如克拉维酸、舒巴坦或三唑巴坦所抑制。产ESBLs的菌株主要见于大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和奇异变形杆菌。 目前，临床微生物实验室检测产ESBLs菌株的方法主要有初筛试验、协同试验和酶抑制剂增强试验。 （1）、初筛试验：初筛试验有纸片法和稀释法两种，这里以稀释法为例。按照常规稀释法接种受试菌。经35℃孵育16~20h。结果判断：①大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌MIC：头孢泊肟≥4μg/ml、头孢他啶≥1μg/ml、氨曲南≥1μg/ml、头孢噻肟