第六章+微生物的遗传与变异.ppt

例如 筛选能降解石油的细菌？ 3、物理诱变：利用物理因素引起的基因突变。 （1）紫外辐射诱变作用机制：DNA链上的碱基(嘌呤碱和嘧啶碱)吸收的光波波长和紫外辐射发射波长非常接近，使DNA强烈吸收紫外辐射。 （2）DNA结构变化的形式：DNA链断裂、DNA分子内和分子间交联、核酸与蛋白质交联，胞嘧啶和鸟嘌呤的水合作用及胸腺嘧啶二聚体的形成等。 物理诱变因素有：紫外辐射、X-射线、γ-射线、快中子、β-射线和激光等。 ① 光复活(photoreactivation, photorestoration) 这是一种对紫外线引起的胸腺嘧啶二聚体高度专一的修复机制。 (3)DNA损伤的修复 在所有原核生物和真核生物中都存在一种光复合酶。这种酶可以结合胸腺嘧啶二聚体的扭曲了的双螺旋部位。在可见光存在下，光复活酶催化2个胸腺嘧啶碱基再生，正常的A-T碱基对重新形成，过后，光复活酶从已修复好的DNA上脱落。 ②切割(补、除)修复(excision repair) 切除修复是在多种酶参与下将DNA分子中受损伤的部分切除，并以完整的那一条链为模板，合成出切除的部分，从而使DNA恢复正常结构的过程。 这是生物界普遍存在的一种修复机制，它对多种损伤均能起修复作用。 参与DNA切除修复的酶主要有：特异的修复内切酶、核酸外切酶、DNA聚合酶及连接酶等。 ③重组修复 含嘧啶二聚体及其它损伤的DNA也可以先复制，后修复。但复制进行到损伤部位时，无法通过碱基配对合成子代DNA链，它就越过损伤部位，在下一个冈崎片断的起始位置上重新合成引物和DNA链，结果子链在损伤相对应处留下缺口。这种遗传信息有缺损的子代DNA与母链之间，在重组酶的作用下进行同源DNA片断的重组交换。结果子链上的缺口被母链上相应部位的片断所填补。母链上出现的新缺口可通过DNA聚合酶、连接酶修补起来。这种修复方式称为～～。 ④ SOS修复 在DNA受到大范围重大损伤时诱导产生一种应急反应，使细胞内所有的修复酶增加合成量，提高酶活性。或诱导产生新的修复酶(即DNA多聚酶)修复DNA受损伤的部分而成正常的DNA。 ⑤适应性修复 细菌由于长期接触低剂量的诱变剂如硝基胍(MNNG或NG)会产生修复蛋白(酶)，修复DNA上因甲基化而遭受的损伤。 在适应期间产生的修复蛋白的修复作用称为适应性修复。 4、化学诱变：指利用化学物质对微生物进行诱变，引起基因突变或真核生物染色体的畸变。 化学诱变因素对DNA作用形式有3类： （1）亚硝酸、硫酸二乙酸、甲基磺酸乙酯、硝基胍、亚硝基甲基脲等的其中一种，可与一个或多个核苷酸碱基起化学变化，引起DNA复制时碱基配对的转换而引起变异。 （2）5－尿嘧啶，5－氨基尿嘧啶，8－氮鸟嘌呤和2－氨基嘌呤等的结构与天然碱基十分接近，是类似物。它们中的一种可掺入到DNA分子中引起变异。 （3）在DNA分子上缺失或插入一、二个碱基，引起碱基突变点以下全部遗传密码转录和翻译的错误。这类由于遗传密码的移动而引起的突变体，称为码组移动突变体。这种突变称为移码突变。 5、复合处理及其协同效应 诱变剂的复合处理常常表现出明显的协同效应，故其突变率普遍比单独处理高，因而对育种有利。 复合处理的方法有： ①两种或多种诱变剂先后使用； ②两种或多种诱变剂同时使用等； ③同一诱变剂的重复使用。 6、定向培育和驯化 (1)定向培育:人为用某一特定环境条件长期处理某一微生物群体，同时不断将它们进行移种传代，以达到累积和选择合适的自发突变体的一种古老的育种方法。在环境工程中则称为驯化。 (2)应用 工业废水的生物处理中，通过驯化微生物，使其改变原来对营养、温度、pH等的要求，产生适应酶，从而得以处理特种工业废水。 废水生物处理中，微生物的变异现象有：①对营养要求的变异；②对温度、pH要求的变异；③对毒物的耐毒能力的变异；④个体形态和菌落形态的变异及代谢途径的变异等。 收集长期被石油污染的土壤(天然选择性固体培养基），必有适应石油环境利用石油作为食物的细菌，将土壤样品在实验室用石油降解菌选择性培养基，对样品中的石油降解菌进行进一步的选择培养，筛选分离，富集，为下一步的驯化工作奠定基础。　 驯化 选择性培养基（石油）浓度升高 筛选分离 2 3、4 1 4 小考 1 中考 高考 Ames试验：利用细菌模型了解潜在化学致癌物的诱变作用 “生物化学统一性”法则： 人和细菌在DNA的结构及特性方面是一致的，能使微生物发生突变的诱变剂必然也会作用于人的DNA，使其发生突变，最后造成癌变或其他不良的后果。 诱变剂的共性原则： 化学药剂对细菌的诱变率与其对动物的致癌性成正比 超过95%的