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大肠杆菌血清抗体与硫酸庆大霉素偶联构建体靶向药物.doc
91(2011)e136-e143兽医科学研究/locate/rvsc
大肠杆菌血清抗体与硫酸庆大霉素偶联构建体靶向药物
董x伟 陈x军 刘x克 陈x涛 孙x良
xx农业大学动物医学学院,长沙,xx410128,中国轭合物的大肠杆菌血清抗体(Ab)硫酸庆大霉素(GM硫酸)评估的评估能力消除大肠杆菌体外。每个组件的结合在有针对性的药物血清抗体和硫酸庆大霉素的氨基结合羟基PEG6000的氢键,形成稳定的配合物。这个复杂的半衰期4.83 h,无毒副作用,低免疫原性。抗体的结合和庆大霉素之后硫酸,抗体的目标相当好。硫酸庆大霉素的体外抗菌活性增加了1000倍,临床疗效增强100倍,这意味着更高的功效和安全。
1.介绍
细菌病控制主要是依靠化学抗生素。由于细菌耐药性的出现,细菌疾病的预防和治疗越来越复杂(球et al .,2002;克雷格,2001;西蒙斯et al .,2006)。为了抵抗细菌,开发新的抗生素是必要的。由于资源有限,新抗生素越来越难以被发现(美林et al .,2006)。所以有必要转换现有的抗生素到一些新类型的药物(Schentag et al .,2007;马丁和拉尔斯,2004;沈和野中郁次郎,2005)。我们的研究集中在药物针对细菌、靶向药物是新型的抗生素是由增加药物的生物利用度有针对性的药物(针对药物系统、TDS或靶向药物传递系统,服务于聋哑人)是一种新型的药物输送系统,可以实现药物损伤组织,器官、细胞或细胞结构的高性能(利玛窦et al .,2006;Ong et al .,2005)。有针对性的药物治疗能明显提高药物浓度在微生物。因此,可以减少剂量和治疗费用,也可以减少药物的副作用。近年来,抗体共轭靶向药物的开发取得了许多突破时被用于肿瘤的治疗。现在,开发了一些靶向药物治疗与癌症和肿瘤squamous-celled癌(Burtness,2005),腺癌,大细胞Carcinom(Raizer,2005),肺癌(Pao和米勒,2005),小细胞癌,胃肠道间质肿瘤(威尔逊et al .,2006)等。但是没有类比目标药物的细菌。接合的抗体药物目标致病性细菌能产生一种新的抗菌药物目标(Iftach et al .,2006)。新抗菌药物显示针对病原体专门体内和体外。,这样就可以避免浪费,造成平均药物体内分布和治疗可以缩短进入病原体的药物将会更快。同时,减少药物剂量和疗程,药物残留也减少,体内病原体耐药性的出现误点。纯化制备的抗血清,定容的生理盐水加在10毫升抗血清。掺合料离心机在10000克15分钟和收集上清。5毫升饱和硫酸铵(pH值7.8)的上层清液中添加了外加剂与缓慢地缓慢搅拌30分钟没有泡沫。这种掺合料离心机在10000克15分钟获得沉淀。颗粒在1.37 resuspended硫酸铵溶液和离心机10000克15分钟2次。0.01 PBS的降水量洗治疗1次,然后溶解在0.01 PBS。溶解沉淀转入袋透析的过滤器。透析是前12 h的4 C透析液改变每2小时。透析后的抗血清离心机在1000克15分钟。然后,原油提取免疫球蛋白在上层的收购For ion exchange chromatography,
离子交换色谱法、an aliquot of sample was loaded onto a column
一个整除的样本加载到一个列(6 mL of bed volume), packed with preswollen DEAE-cellulose
卷)(6毫升的床上,挤满了preswollen deae纤维素(Whatman, DE-32), and equilibrated with 200 mM citrate–phosphate
(DE-32绘画纸),并与200毫米citrate-phosphate低沉buffer, pH 5.0.
缓冲区,pH值5.0。The column was washed 2 times with 9 mL
列与9毫升洗2次of 20 mM citrate–phosphate buffer, pH 5.0, and eluted with
20毫米citrate-phosphate缓冲区,pH值5.0,和洗提200 mM citrate–phosphate buffer, pH 6.4.
200毫米citrate-phosphate缓冲区,pH值6.4。The elution profiles of
的洗脱概要文件samples were plotted, and fractions that make a peak were pooled
样本绘制,分数峰值是汇集and analyzed for antibody activity
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