第八章真核生物基因表达调控.pptVIP

第八章 真核生物基因 表达调控 教学目的： 了解真核基因表达调控的特点 了解转录前的调控， 掌握增强子的作用特点 掌握反式作用因子的DNA结合域的结构花式； 了解转录后加工水平的调控方式， 掌握可变剪接、反式剪接、RNA编辑的概念； 了解翻译水平的调控方式及特点。 第一节 概述 第二节 转录水平的调控 第三节 转录后加工水平的调控 第四节 翻译的调控 原核与真核生物基因表达的差异 第一节 概述 第二节 转录水平的调控 第三节 转录后加工水平的调控 第四节 翻译的调控 1 顺式作用元件 2 反式作用因子 1 基因转录的顺式作用元件(cis-acting elements) 顺式作用元件：对基因表达有调节活性的DNA序列，其活性只影响与其自身同处在一个DNA分子上的基因； 通常不编码蛋白质，多位于基因旁侧或内含子中。 包括: 启动子、终止子、增强子、沉默子、静息子、转座子、效应元件等。 II型启动子组成 (1) 核心启动子成分，如TATA框； (2) 上游启动子成分（UPE），如CAAT框， GC框，八聚体（octamer）等； (3) 转录起始子（Inr） 真核启动子含有不同的序列，不同序列的位置、种类、距离和方向都不完全相同； SV40 早期启动子 胸苷激酶 组蛋白H2B -140 -120 -100 -80 -60 -40 -20 +1 Oct CAAT GC TATA 1.2 增强子 Enhancer 又称远端上游序列（far upstream sequence）。 最早SV40病毒中发现，可使旁侧基因转录提高100倍。 组成：100-200bp，单拷贝或多拷贝串连形式存在。 正性调控元件，转录因子结合，促进转录。 增强子的作用特点： 促进基因的转录效率远距离发挥作用 (100~500bp，10Kb) 促进转录，不具有启动子专一性 功能与方向、位置无关 具有组织或细胞特异性 对同源或异源基因均有功能。 1.3 沉默子 silencer 负性调控元件， 转录因子结合抑制转录。 作用特点： 不受序列方向的影响， 能远距离发挥作用， 并可对异源基因的表达起作用。 1.4 转座子 转座子---跳跃基因的移动，有时候能够激活或抑制某些结构基因的表达。 效应元件的特点： 有短的保守顺序； 是启动子或增强子的上游元件。 在不同基因中，拷贝相似，有时有多个拷贝； 与转录起点距离不固定。 1 顺式作用元件 2 反式作用因子 2 反式作用因子（trans-acting factors） 反式作用因子：通过扩散自身表达产物（酶、调节蛋白）控制其他基因的表达，其编码基因与其识别或结合的靶序列不在同一个DNA分子上。 包括：转录因子、RNA聚合酶、调控蛋白等。 2.1 反式作用因子的分类 2.2 反式作用因子的调控作用 (3) 诱导型因子：和效应元件（特异调控序列）结合的蛋白因子。 2.2 反式作用因子的调控作用 蛋白质和DNA相互作用； 蛋白质和配基结合； 蛋白质之间的相互作用; 蛋白质的修饰。 DNA结合域，binding domain，BD：100aa， 大沟 转录激活域，active domain，AD：30-100aa （1） 转录激活域 带负电荷的螺旋结构 如GCN4，GAL4 rich-Gln 如SP1, AP2, oct1, oct2 rich-pro 如CTF/NF1 （2） DNA结合域的结构花式/基元（ motif） 锌指结构（Zinc finger ） 螺旋-转角-螺旋结构（helix-turn-helix，HTH） 同源异形结构域（Homeodomains，HD） 螺旋-环-螺旋结构（helix-loop-helix，HLH） 亮氨酸“拉链” （leucine zipper ） ① 锌指（zinc finger） 由一小组保守的氨基酸和锌离子结合，形成了相对独立的功能域，像一根根手指伸向DNA的大沟。 有两种基本构型； A. Cys2/His2 ~23aa，两指间7-8aa 共有序列： Cys-X2-4-Cys-X3-Phe- X5-Leu-X2-His-X3-His 串联重复排列， 锌指数目多少不等 SP1 B. Cys2/Cys2 Zn2+与4个Cys结合 共有序列：Cys- X2- Cys-X13- Cys- X2- Cys 无大量重复性锌指 （2） DNA结合域的结构花