任务1-2培养基制备.ppt

情景1.2 按照宋主任修改后的计划，共需要制作几种斜面培养基，根据每支菌种活化20支，每种培养基的用量是多少呢？每种化学试剂需要多少？不溶解的物质如何处理？ 任务1-2 斜面培养基制作 如果你是任玲同学，将如何完成这项工作，你需要先解决哪些问题呢？ 任务1-2 培养基制备 1.这么多的菌种，应该用什么样的培养基呢？ 培养基都有哪些种类呢？ 2.培养基的成分必须满足微生物哪些营养需求？ 3.本次任务中需要用到什么培养基？在教材中查找到其配方，并说明各成分的属于哪类营养物质，有什么作用？ 4.琼脂固体培养基的融化和凝结温度分别是多少？是不是可以无限反复融化凝结？ 5.固体和半固体琼脂加入量通常是多少？如果琼脂不凝固可能是由哪些原因造成的？ 6.培养基制备原则有哪些？ 1.完成以上问题，各分组做出培养基制备的工作流程和注意事项。 2.按照实训中心给定的条件，合理划分工作阶段、小组工作任务和个人工作任务。 3.拟定工作详细流程和时间安排，设计过程记录和结果报告方法。 4.各组由组长阐述小组的实施方案，全班共同讨论各个小组的方案，整合意见，修订上述操作流程、所需器材、试剂、结果记录和报告方法，确定实施方案。 培养：每垛最多堆放6个平板；对于液体培养基，体积、内容物量、容器类型、培养类型等因素影响培养温度。 培养基的弃置：所有污染的和未使用的培养基的弃置必须采用安全的方式。 培养基的保存 培养基应存放于冷暗处，最好能放于普通冰箱内 放置时间不宜超过一周，倾注的平板培养基不宜超过3天 每批培养基均必须附有该批培养基制备记录副页或明显标签 能发生化学反应或含用不稳定成分的固体培养基不能批量制备和再次融化使用 1.按经批准的方案实施任务，设计并填写记录单。 具体任务： 任务1-2 培养基配制 2.记录过程，观测并报告结果。 1.自我评价、小组评价与教师评价相结合，填写工作任务评价表、关键能力评价表。 2.小组代表展示项目任务结果，分析得失，总结解决问题的途径，接受质询。 3.全班讨论，评价结果和总结解决问题的途径，提出可能改进之处。 4.教师点评、总结。 （3）抑制剂 可抑制某些不需要的产物形成，同时还刺激有益于积累产物的代谢途径，促使目标产品产量提高的一类物质。 例如：在四环素发酵中，加入溴化物能抑制金霉素的形成，从而增加四环素的产量。 6.水分 存在形式： 游离水和结合水两种状态 功能：生化反应均在水溶液中进行 二、培养基的类型 1.按培养基的物理状态来分： （1）固体培养基　 琼脂用量　1.5％～2.0 ％ （2）半固体培养基　 琼脂用量　0.5 ％ ～0.8 ％ （3）液体培养基　 不加凝固剂　常用于规模工业生产及基础理论和应用研究。 二、培养基的类型 2　按培养基的成分划分 （1）天然培养基 含有化学成分不清楚或不恒定的天然有机物。 （2）合成培养基 化学成分完全明确 （3）半合成培养基（用的最多） 既含有天然有机物有含有纯化学试剂。 四、培养基配制的原则 1.明确目的：培养何菌？获何产物？大规模发酵生产还是科学研究？ 2.选择适宜营养成分 　　细菌　　 高氏1号培养基 　　酵母菌　 牛肉膏蛋白胨培养基 　　霉菌　　 查氏培养基 　　放线菌　 麦芽汁培养基 四、培养基配制的原则 3、注意各营养物质的浓度和配比 　 如：利用微生物生产谷氨酸时，C/N＝4/1则菌体多，产物少；C/N＝3/1时菌体繁殖受到抑制，产物增加。 三、培养基配制的原则 4.调节适宜的物理化学条件 　　　　　　最适值 　 细菌　　　7.0～8.0 　 放线菌　　 7.5 ～8.5 　 酵母菌　　 3.8 ～6.0 　 霉菌　　　4.0 ～5.8 　 常用缓冲剂：KH2PO4 和K2HPO4，调节pH范围6.4 ～7.2，如果是由乳酸菌产生的酸性环境，则可用碳酸钙来调节。 5.其它 　灭菌、培养基的保存、廉价易得 　　　　　 　配制方法： 1、生态模拟 2、查阅文献 3、借助优选法或正交试验法精心设计培养基配方 4、实验比较 实验的规模一般由定性到定量，由小到大。 培养基的用途与要求、成分、配比经实验确定，配制时兼顾原料来源、成本及工艺管理。 五、培养基的制备 　配制流程： 1.原料的预处理 　 如生产酒精、丙酮等代谢产物时，淀粉原料　需先进行蒸煮、糖化；以糖蜜为原料生产柠檬酸时，要先加入黄血盐除铁离子等。 2.称量、溶解 3.调节pH值 4.过滤和澄清：纱布和棉花 5.分装和加棉塞：