抗原抗体反应.ppt

概念：抗原抗体反应是指抗原抗体的特异性结合反应 本章内容： Section 1 抗原抗体反应的原理 抗原抗体 图 抗原抗体结合力 2.范德华引力（Van der Waals forces） （3）氢键结合力（hydrogen bounding force） 4.疏水作用力 （ hydrophobic force ） 指疏水基团间排斥水分子，相互聚集的 力。作用力最强，占总结合力的50％。 抗原抗体结合力 大小都与两分子间的距离密切相关 只有两分子表面密切接触时，才能产生足够的力使其结合 抗原与抗体之间高度的空间互补结构恰好为这些结合力的发挥提供了条件 结合力的大小 亲和力（affinity）： 亲合力（avidity） 指整个抗体分子与抗原表位之间结合的强度 “all points-------all points” Section 2 抗原抗体反应的特点 二、比例性 (proportionality) 网格学说（图） 网格学说（图） 切记！！！！ 确定 的浓度非常重要，即在实验中需对Ag/Ab进行适当的 ，调整二者的比例，产生可见反应。 一般原则：固定 含量（ Ag/Ab ）的浓度，稀释 含量的 (Ab / Ag)。 一般可溶性Ag稀释 ，颗粒性Ag，稀释 。 三、可逆性（reversibility）或表面性 四、阶段性 Section 3 影响抗原抗体反应的因素 （二）Ab 二、环境因素 （二）酸碱度 Ag、Ab多为蛋白质，具两性电离特性，有其故有的PI , pH过高或过低均可影响Ag、Ab反应。 一般：pH6～8为宜，补体参与时pH7.2～7.4。 注意：自凝现象------即pH达到或接近颗粒性抗原的PI时，引起的抗原非特异性自身凝集现象。 （三）温度—影响反应速度 表 杂交瘤技术与单克隆抗体 G. Kohler, C. Milstein 1975 酶标免疫技术 S. Avrames, J. Uriel, et al 1966 放射免疫标记 R. Yallow, S. Berson 1960 免疫电泳分析,Ig多样性 P. Grabar, C. Williams 1953 双扩散沉淀反应 O. Ouchterlony, S. Elek 1948 凝胶内沉淀反应 J. Oudin 1946 免疫荧光标记 A. Coons 1941 纯化抗体,定量沉淀反应 M. Heidelberger, F. Kendall 1935 梅毒补体结合反应 A. Wassermann 1906 人类ABO血型及其抗体 K. Landsteiner 1900 补体结合反应 J. Bordet, O. Gengou 1900 沉淀试验 R. Kraus 1897 肥达试验 G. Widal, A. Sicad 1896 特异凝集反应 H. Durham, M. von Gruber 1896 补体与溶菌活性 J. Bordet 1894 贡献 学者 年代 免疫学技术的发展史 抗原抗体反应的基本类 型 表 反应类型 实验技术 检测方法 敏感度 沉淀反应 液相沉淀试验 观察沉淀、检测浊度 +，++++ 琼脂凝胶扩散 观察扫描沉淀线或环 + 凝胶电泳技术 或峰或弧 ++ 补体参与反应 补体溶血试验 以裸眼或光电比色仪 ++ 补体结合试验 观察测定溶血现象 +++ 免疫标记技术 荧光免疫技术 检测荧光现象 ++++ 放射免疫技术 检测放射性 ++++ 酶标免疫技术 检测酶底物显色 ++++ 发光免疫技术 测定发光强度 ++++ 生物素-亲合素技术 结合其它标记技术 ++++ 金标免疫技术 检测金颗粒沉淀 ++++ 凝集反应 直接凝集试验 用裸眼、放大镜或显 + 间接凝集试验 微镜观察红细胞或胶 ++ 凝集抑制试验