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1．了解离体器官试验特点及注意事项，掌握离体器官试验的基本技术。 2．学习利用离体器官进行药物筛选的方法，观察受试物对离体胃、肠平滑肌的影响。 3．了解科研课题设计原则，科研课题立项需阐述的相关内容。 4．了解科研论文写作规范（包括图表制作技巧等）。 5．掌握试验数据统计、处理方法。 离体器官试验常用的离体器官有心脏、血管、肠段、子宫及神经肌肉标本，用离体标本可比较直观地观测药物的作用。不同的动物标本用于测定不同类的药物作用。 在离体器官法中，不同动物的不同器官都要求最适宜的营养环境，因此各种动物的人工生理溶液成份和配制都有区别。在离体器官研究中应特别引起重视。 世界卫生组织调查表明，我国有80%的人患有不同程度胃肠病居世界首位。近年来，功能性胃肠病已受到广泛的关注，如功能性消化不良、肠胃激综合征、功能性便秘等，，西方国家人群患病率为5%～24%，每年花费高额的医疗费用，患者的生存质量亦受到不同程度的影响。在最常见造成工作、学习缺勤的疾病中，肠易激综合征的发病率仅次于普通感冒.目前主要采用解痉剂治疗，但只能缓解腹痛，不能治疗便秘。而缓泻剂能缓解便秘，但不能缓解腹痛、腹胀，而且不能长期服用。因此，研究开发新的调节胃肠动力的药物有重要的社会效益和广阔的市场前景。 * 促胃肠动力药物筛选 —离体组织、器官水平药物筛选 武汉大学药学院 药理系 目的 背景知识 背景知识 渗透压：要等渗，但不同动物对同一物质的等渗浓度要求不同。如生理盐水溶液，冷血 动物用0.6～0.75%；温血动物用0.8%～0.9%。 各种离子：一定比例的不同电解质离子Na+、K+、Ca2+、Mg2+、H+、OH-等是维持 组织器官功能所必须。组织器官不同，对生理溶液中离子的成份和浓度要求亦不同。 pH影响：人工生理盐水中pH一般要求为中性，对于哺乳动物心脏冠状动脉，酸性生 理深夜可使平滑肌松驰；碱性则可使节律加快，振幅缩小。 其它条件：葡萄糖提供组织活动所需能量，临用时再加入，以防变质；有的离体 器官需要氧气，如离体子宫、离体兔心、乳头肌等。而离体肠管通以空气就可以了。 背景知识 背景知识 甲氧氯普胺 第一代 第二代 多潘立酮 它可作用于胃肠道 和中枢神经系统， 兼有促动力和止吐 的功效。可增加食 管下端括约肌的张 力，使其压力增加 加强胃内固体和液 体的排空，还可协 调胃窦和十二指肠 运动，对肠道无明 显作用 第三代 西沙比利 它对整个胃肠道包括 从食管到肛门括约肌 均有促动力作用，能 增强生理反应，恢复 正常的动力模式。 临床常用促动力药 中药 百合、乌药、 帜实、虎杖 最突出的特点在于标 本兼治 ，但作用机制 不明确，组方尚缺少 现代药理学研究的支 持。通过离体胃肠平 滑肌试验，探讨药物 作用机制、组方依据 ，为新药提供线索。 教学试验安排 （一）教学分组 在一个教学单元内，根据学生人数，将学生分为8组，每组2～5人，并分成上下两班，4组/班。 （二）试验方案 1．上半班采用胃平滑肌作为试验材料，建议受试物：百合、或乌药、或 帜实、或虎杖、或四药合并的水提取物，也可采用各教学单位自行提取的物质，用于筛选。西药对照：胃复安、西沙必利。 2．下半班采用肠平滑肌作为试验材料，建议受试物：百合、或乌药、或帜实、或虎杖、或四药合并的水提取物，也可采用各教学单位自行提取的物质，用于筛选。西药对照：胃复安、西沙必利。 试验方法及步骤 （一）试验材料 1．动物：大鼠（220～280g/只），雄性。 2．器材：恒温平滑肌槽1台、通气泵1个、铁支架1个、止水夹2个，生物信号采集处理系统，张力换能器，1ml注射器4个，培养皿1个，50ml烧杯1个，组织剪、眼科剪各1把，止血钳两个，镊子两个，丝线若干，移液器一个，砝码一个。 3．试剂：台氏液。 4．受试药：0.5%胃复安溶液；0.1%西沙必利溶液；20%百合水提取物；10%乌药水提取物；15%帜实水提取物；15%虎杖水提取物；15%四药合并的水提取物。 试验方法及步骤 （二）试验步骤 1．对大鼠离体胃平滑肌正常张力的影响试验。　 （1）制备胃肌条标本：断头处死，立即剖取胃底部浸泡于台氏液液中， 制备成“Z”型，长约2.5cm、宽约0.4cm的胃肌条标本。 （2）冲洗浴槽，并在其中加入台氏液30ml（标线处），加热，维持水温在37℃～ 38℃。调节通气泵，缓慢通入气泡，并调节1～2个气泡/秒。 （3）取标本，两端对角处用丝线结扎。一端挂在通气钩上，放入浴槽，另一端从张力 换能器的弹簧片小孔中穿出并挂上1g砝码（给予负荷），打开计算机，进入生物信号 采集系统，选择“张力通道”，观察活动曲线。待其平衡后，用丝线将挂砝码的丝线牢 牢固定于弹簧片上，除去砝码。 （4