15柠檬酸循环15.1丙酮酸脱氢酶复合物催化丙酮酸脱羧形成乙酰CoA.ppt

* 15 柠檬酸循环 15.1 丙酮酸脱氢酶复合物催化丙酮酸脱羧形成 乙酰CoA 15.2 柠檬酸循环包括八步酶促反应 15.3 柠檬酸循环产生的还原型辅酶通过氧化磷 酸化可以生成ATP 15.4 柠檬酸循环受到严密的调控 15.5 柠檬酸循环中存在着几处代谢物进出口 15.6 植物中乙醛酸循环是柠檬酸循环的支路 柠檬酸循环又称为三羧酸循环（TCA循环），因为循环中存在三羧酸中间产物。该循环是由H.A.Krebs提出的，又叫做Krebs循环。 柠檬酸循环既是分解代谢途径，又是合成代谢途径，可以说是分解、合成两用途径。 柠檬酸循环中的酶分布在线粒体中。在真核生物中，丙酮酸首先要转运到线粒体内，然后才能进行转换成乙酰CoA的反应。 嵌在内膜中的丙酮酸转运酶可以特异地将丙酮酸从膜间质转运到线粒体的基质中，进入基质的丙酮酸脱羧生成乙酰CoA，经柠檬酸循环进一步被氧化。 15.1 丙酮酸脱氢酶复合物将丙酮酸转化为乙酰CoA 丙酮酸脱氢酶复合物是个多酶集合体，复合物中的酶分子通过非共价键联系在一起，催化一个连续反应，即酶复合物中一个酶反应中形成的产物立刻被复合物中下一个酶作用。 丙酮酸脱氢酶复合物位于线粒体膜上，是由丙酮酸脱氢酶（E1）、二氢硫辛酰胺乙酰转移酶和二氢硫辛酰胺脱氢酶（E3）三种酶，以及TPP（焦磷酸硫胺素）、CoASH、硫辛酸、FAD 、NAD＋和Mg2+ 6种辅助因子组成的。 （1）E1催化丙酮酸脱羧，并将剩下的二碳片段转移到E2的组成成分硫辛酰胺上。 （2）辅酶A与乙酰-二氢硫辛酰胺中的乙酰基反应生成乙酰CoA，并释放出二氢硫辛酰胺。至此丙酮酸转换为乙酰CoA 的反应已经完成，为了能够进行下一轮的丙酮酸转换为乙酰CoA 的反应，必须要将二氢硫辛酰胺转换为硫辛酰胺。 （3）E3催化E2的二氢硫辛酰胺氧化重新形成硫辛酰胺，带有硫辛酰胺的E2再参与下一轮反应。E3的辅基黄素腺苷二核苷酸（E3-FAD）使二氢硫辛酰胺氧化，同时辅基本身被还原生成E3-FADH2，然后E3-FADH2再使NAD＋还原，生成NADH和起始的全酶E3-FAD。 丙酮酸转化为乙酰CoA的反应实际上不是柠檬酸循环中的反应，而是酵解和柠檬酸循环之间的桥梁，真正进入柠檬酸循环的是丙酮酸脱羧生成的乙酰CoA。 15.2 柠檬酸循环包括八步酶促反应 由丙酮酸形成的乙酰CoA或者是其它代谢途径（如脂肪酸或氨基酸的分解代谢途径）产生的乙酰CoA可以通过柠檬酸循环氧化，柠檬酸循环涉及八步酶促反应。 1 缩合 2a 脱水 2b 水化 3 氧化脱羧 4 氧化脱羧 5 底物水平磷酸化 脱氢 7 水化 8 脱氢 乙酰CoA中乙酰基与草酰乙酸缩合形成 6 碳的柠檬酸，经过 2次氧化脱羧释放出两分子CO2后，形成 4 碳酸－琥珀酸，琥珀酸经过几步反应后又重新转换为草酰乙酸。 由于草酰乙酸可以再生，所以柠檬酸循环可以看作是一个催化多步反应的催化剂，使得乙酰CoA中的二碳单位乙酰基氧化成 2分子CO2。 进入柠檬酸循环中的2个碳原子的去向 1、 柠檬酸合成酶催化乙酰CoA与草酰乙酸缩合形成柠檬酸 这是柠檬酸循环的第一个反应，乙酰CoA与草酰乙酸缩合形成柠檬酸和CoASH，反应是由柠檬酸合成酶（也称为柠檬酸缩合酶）催化的。 2、顺乌头酸酶催化前手性分子柠檬酸转化成手性分子异柠檬酸 柠檬酸是个三级醇，不能被氧化为酮酸，顺乌头酸酶把柠檬酸转化为可氧化的二级醇异柠檬酸，酶的名称来自与酶结合的反应中间产物顺乌头酸。 柠檬酸由顺乌头酸酶催化脱水，形成C＝C双键，然后还是在顺乌头酸酶催化下，通过水的立体特异性添加，生成异柠檬酸。 非洲的南部有一种植物（Dicha petalum cymosum）可以产生出氟乙酸，氟乙酸有剧毒，在细胞内它可以转化为氟乙酰CoA，氟乙酰CoA在柠檬酸合成酶的催化下又可与草酰乙酸缩合生成氟柠檬酸。氟柠檬酸类似于柠檬酸，是顺乌头酸酶的一个很强的抑制剂，所以氟乙酸会终止经柠檬酸循环的有氧代谢。 3、异柠檬酸脱氢酶催化异柠檬酸氧化生成?-酮戊二酸和CO2 这一步反应是柠檬酸循环中四个氧化还原反应的第一个，是由异柠檬酸脱氢酶催化的。NAD＋作为酶的辅酶。异柠檬酸脱氢使NAD＋还原为NADH＋H＋的同时生成一个不稳定的β-酮酸草酰琥珀酸，草酰琥珀酸经非酶催化的β脱羧作用生成?-酮戊二酸和CO2，反应是不可逆的。 4、?-酮戊二酸脱氢酶复合物催化?-酮戊二酸氧化脱羧生成琥