第四节黄酮类化合物的检识与鉴定.ppt

黄酮类化合物(flavanoids) 第一节 概述 一、黄酮类化合物的定义及编号 两个取代芳香环通过中央三碳链连接而成的一系列化合物 取代基：-OH，OCH3，CH3，异戊烯基，糖 二、黄酮类化合物生物合成的基本途径 三、黄酮类化合物的分类 依据：中央三碳链的氧化程度、B-环连接位置(2-位或3-位)、以及三碳链是否成环 分类： 三、黄酮类化合物的分类 依据：中央三碳链的氧化程度、B-环连接位置(2-位或3-位)、以及三碳链是否成环 分类： 四、黄酮苷类化合物 分类：氧苷（3-位黄酮醇苷，芳环羟基苷）、 碳苷 单糖苷、双糖苷 单糖链苷、双糖链苷 五、各类黄酮类化合物的生物合成关系 六、黄酮类化合物的生物活性 对心血管系统的作用 银杏黄酮 抗肝脏毒作用 抗炎作用 芦丁、二氢槲皮素等 六、黄酮类化合物的生物活性 雌性激素样作用 抗菌及抗病毒作用 黄芩苷、木犀草素等 止咳、祛痰、平喘作用 六、黄酮类化合物的生物活性 抗氧化作用 抗癌作用 第二节 黄酮类化合物的理化性质及显色反应 一、性状 固体，具旋光(二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷醇、黄酮苷) 黄色、淡黄色、无色 二、溶解性 苷元：脂溶性(甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚、稀碱水等) 水溶性：1. 黄酮、黄酮醇、查耳酮等(平面) 二氢黄酮、二氢黄酮醇(非平面) 2. 羟基取代黄酮类 甲氧基取代黄酮类 黄酮苷：水、甲醇、乙醇 三、酸碱性 酸性：酚羟基 与碱作用而溶于水中（用于提取） 碱性：1-位氧原子 与强酸成盐，表现出特殊颜色（用于鉴别） 四、显色反应 1、还原试验 盐酸-镁粉(锌粉)反应：试样乙醇液+镁粉+浓盐酸（橙-紫-蓝） NaBH4还原反应：试样乙醇液+2%NaBH4+浓酸（紫红） 鉴别二氢黄酮 四、显色反应 2、金属盐络合反应： AlCl3、Pb(OAc)2、 Mg(OAc)2 3、硼酸显色反应：5-羟基黄酮 或 2’-羟基查耳酮 4、碱性试剂：氨气、Na2CO3 二氢黄酮→查耳酮，亮黄色 黄酮醇→黄色→通空气后棕色 多羟基黄酮→氧化（深红色） 第三节 黄酮类化合物的提取与分离 一、提取 苷元：乙酸乙酯、乙醚、氯仿、乙醇、甲醇等有机溶剂 黄酮苷：丙酮、乙酸乙酯、乙醇、水或混合溶剂 注意：水解酶的灭活(提取黄酮苷) 1.植物冷冻处理 2.植物干燥 2.热水提取 3.有机溶剂提取 第三节 黄酮类化合物的提取与分离 二、粗提物的精制（除叶绿素、多糖、蛋白质） 1、溶剂萃取法 石油醚脱酯 醇沉除多糖及蛋白 2、碱提酸沉法 黄酮苷类碱水提取、酸化后沉淀 注意：碱性过强——破坏黄酮母核 酸性过强——生成氧盐而溶解 3、大孔树脂吸附法 黄酮苷水溶液大孔树脂吸附——水洗杂质——乙醇解吸 第三节 黄酮类化合物的提取与分离 三、黄酮类化合物的分离纯化 1、柱色谱法 薄层色谱确定分离条件：固定相及流动相 要求：样品不拖尾 Rf值适中 第三节 黄酮类化合物的提取与分离 三、黄酮类化合物的分离纯化 1、柱色谱法 (1)硅胶柱色谱： 脂溶性黄酮类：硅胶吸附层析 展开剂：乙酸乙酯-石油醚；氯仿-甲醇 多羟基黄酮苷元及黄酮苷：硅胶分配层析 展开剂：氯仿-甲醇-水 第三节 黄酮类化合物的提取与分离 三、黄酮类化合物的分离纯化 1、柱色谱法 (2)聚酰胺柱色谱：适于分离黄酮类化合物 洗脱规律：a羟基多，吸附强，后洗出 b由先至后：异黄酮二氢黄酮醇黄酮黄酮醇 C芳核及共轭双键多易吸附 优点：不脱尾，不可逆吸附鞣质 缺点：弱碱性，破坏黄酮 类化合物母核或使其聚合 聚酰胺的再生：5%NaOH 第三节 黄酮类化合物的提取与分离 三、黄酮类化合物的分离纯化 1、柱色谱法 (3)葡聚糖凝胶柱色谱：Sephadex-G 及 Sephadex-LH20(羟丙基葡聚糖凝胶，-OH -OCH2CH2CH2OH） Sephadex-G: 排阻色谱，分子量大先流出 Sephadex-LH20：排阻及吸附色谱 分离游离黄酮，吸附作用主导(酚羟基多，吸附强) 分离黄酮苷分子