生化工程-1课件.pptVIP

碟式离心机适合于细菌、酵母、放线菌等多种微生物细胞悬浮液及细胞碎片悬浮液的分离。它的生产能力较大，最大允许处理量可达300m3／h，一般用于大规模的分离过程。 第三节 生化产品分离技术的发展 一、膜技术推广的应用 二、亲和层析的推广应用 三、优质层析介质的研究 四、上游技术对分离技术的影响 五、发酵与提取相结合 一、膜技术推广的应用 随着膜本身质量的改进和膜装置性能的改善．在生化产品分离过程的各个阶段，将会越来越多地使用膜技术。 例如: 某公司在提取头抱菌素c的过程中，研究利用微滤进行发酵液的过滤；利用超滤去除杂质蛋白和色素；利用反渗透进行浓缩，最后结合HPLC进行精制，制得纯度达93％的成品c 二、亲和层析的推广应用 利用生物亲和力可使分离的选择性大大提高，在下游加工过程的各个阶段，都正在使用或有可能使用亲和技术，除亲和层析外，还有亲和分配、亲和沉淀、利用亲和力的膜过滤等。利用单抗的免疫吸附层析，选择性最理想，但介质的价格太高，急需研究改进。 三、优质层析介质的研究 色层分离中主要困难之一是层析介质的机械强度差，以天然糖类为骨架的介质，目前已研究出高交联度或能与无机介质相结合的产品。 四、上游技术对分离技术的影响 生化工业从原料到产品是一个整体，上游技术必须考虑到下游提取的难易及成本。 例如，将原来是胞内的产物变为胞外产物(或使处于围膜间隙)；在细胞中高水平的表达形成细胞内的包涵体，在细胞破碎后即可在低离心力下沉淀，因而容易分离；利用基因工程方法，使尿抑胃素上接几个精氨酸残基，使其碱性增强，而易为阳离子交换剂所吸附等。 五、发酵与提取相结合 在发酵过程中，把产物除去以避免反馈抑制作用 如：利用半透膜的发酵罐、在发酵罐中加入吸附树脂等。 右图是胞内酶的分离，在分离过程中，分别使用了过滤、沉淀、渗析、超滤、层析、离心、匀浆及冷冻干燥等单元操作． 右图是青霉素生产的流程，由图表明，对青霉素的分离，需要使用过滤、蒸发、萃取、结晶、离心及冷冻干燥等操作。 右图是乳酸的分离，它也使用了多种单元操作，致最终获得要求的产品。 碟式离心机 碟式离心机是立式离心机的一种，转鼓装在立轴上端，通过传动装置由电动机驱动而高速旋转。转鼓内有一组互相套叠在一起的碟形零件--碟片。碟片与碟片之间留有很小的间隙。悬浮液（或乳浊液）由位于转鼓中心的进料管加入转鼓。当悬浮液（或乳浊液）流过碟片之间的间隙时，固体颗粒（或液滴）在离心机作用下沉降到碟片上形成沉渣（或液层）。沉渣沿碟片表面滑动而脱离碟片并积聚在转鼓内直径最大的部位，分离后的液体从出液口排出转鼓。碟片的作用是缩短固体颗粒（或液滴）的沉降距离、扩大转鼓的沉降面积，转鼓中由于安装了碟片而大大提高了分离机的生产能力。积聚在转鼓内的固体在分离机停机后拆开转鼓由人工清除，或通过排渣机构在不停机的情况下从转鼓中排出。 影响分配的系数 聚合物的分子量 聚合物的浓度 盐类 pH值 分子量越小，蛋白质容易分配于富含该聚合物的相中。 当接近分配的临界点蛋白质均匀分配于两相中，分配系数接近1； 成相聚合物的总浓度或聚合物/盐浓度的比例增加时，系统远离平衡点，此时两相性质的差别增加，蛋白质容易趋向于某一极。 盐浓度增加促使蛋白质两极分化 对物质解离度影响 三步双水相萃取流程图 要成功地运用两水相萃取的方法，应满足下列条件： 欲提取的酶和细胞应分配在不同的相中； 酶的分配系数应足够大，使在一定的相体积比时，经过一次萃取，就能得到高的收率； 两相用离心机很容易分离。 (3)沉淀： 降低蛋白质溶解度，如等电点沉淀、盐析等。 (4) 膜分离： 膜分离是基于一种半透性薄膜，使溶液中的某些组分通过，而阻止或截留其它组分的分离方法。它包括反渗透法(Reverse Osmosis)和超滤法(Ultrafiltration)。 依据物质粒度大小这一几何特性的差异，来分离物质，而不必像萃取、沉淀法中那样，需要加入其它物质(溶剂、盐类)，也不必像蒸发那样，需要加热。因此，使用膜分离法分离，产品的损失很少。 膜分离法的优点 若干生物物质的粒度特征 渗透和渗透压 1885年, Van’t Hoff渗透压定律： ?? ? ?·R·T·?Ci 渗透是在膜两边渗透压差- ??的作用下的溶剂流动；而反渗透、超滤是在一外加压力差 ?P ?? 的作用下, 溶剂逆向流动。 盐溶液 纯水 H2O 渗透 ?? ?P ?? 反渗透 当某溶液与某纯溶剂之间被一半透性薄膜隔开时，由于系统中的