菌落总数不确定度评定方案.docVIP

污水中菌落总数测定结果的不确定度评定 1、引用标准 依据GB/T 5750.12-2006《生活饮用水标准检验方法微生物指标》的方法。 适用范围 污水及生活饮用水中菌落总数的测定 检测方法 以无菌操作方法吸取1ml充分混匀的水样，注入盛有9ml无菌生理盐水的试管中，混匀制成1：10的稀释液；吸取1：10的稀释液1ml注入盛有9ml无菌生理盐水的试管中，混匀制成1：100稀释液；按同法依次制成1：1000、1：10000的稀释液备用；用灭菌吸管取未稀释的水样和2～3个适宜稀释度的水样1ml，分别注入灭菌平皿内，每个稀释度作2个平皿。然后在平皿内注入45℃左右营养琼脂约15ml，立即旋摇混匀，同时做营养琼脂空白对照；待琼脂凝固后，翻转平皿，置36±1℃培养箱内培养48h，进行菌落计数；选择菌落数在30～300稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数作为检测结果。 本次实验选取一个水样（已预试验），制备成1：10的稀释液，分别稀释13次，制备13管备用，每管均做两个平行，吸取另一管时需换枪头，测得的结果乘以稀释倍数后再进行分析。 4、建立数学模式 y=x 5、不确定度来源分析 水样菌落总数检验中不确定度的来源有：样品保存条件，包括保存温度和保存时间；试剂，如培养基等；培养条件，包括培养时间的允差和培养湿度的允差；取样，包括稀释体积和取样体积；测量重复性。 样品中菌落总数测定的不确定度主要取决于细菌分布的均匀性，表现为测量的重复性，其他诸多影响因素相对于测量重复性可忽略不计。因此本实验仅考虑测量重复性引起的标准不确定度。 6、不确定度的评估 由于微生物测量结果分散性很大，其最大值与最小值之间可相差到1个数量级，因此不能直接利用测量数据做不确定度评估，而需要对数据做对数处理。 实验编号 平皿1 平皿2 Si2 x1j lgx1j x2j lgx2j 1 15360 4.1864 12460 4.0955 0.0041 2 1160 3.0645 1980 3.2967 0.0270 3 2040 3.3096 3220 3.5079 0.0196 4 3760 3.5752 2320 3.3655 0.0220 5 1320 3.1206 1220 3.0864 0.0006 6 2140 3.3304 1070 3.0294 0.0453 7 6760 3.8299 2870 3.4579 0.0692 8 2810 3.4487 4270 3.6304 0.0165 9 12400 4.0934 9780 3.9903 0.0053 10 5790 3.7627 4270 3.6304 0.0087 11 1500 3.1761 6180 3.7910 0.1890 12 1290 3.1106 1480 3.1703 0.0018 13 5290 3.7235 4640 3.6665 0.0016 　 求和 45.7315 　 45.7181 0.4109 具体计算过程如下： 共测量13个样品，每个样品测量两次。 对测量结果x1j和x2j取对数，分别得到lgx1j和lgx2j。 对每一试样结果分别计算其残差的平方和： 由样品的残差平方和，计算13个试样的合并样本标准差。得到 每个样品测量两次，故两次测量平均值的标准不确定度为 根据置信概率p=0.95 和自由度v=13，由t分布表得到包含因子k=2.16。于是扩展不确定度为 以区间的形式表示 （8）样品的取值范围为 换算到x坐标，得水样菌落总数含量x所在的区间为 结果报告 该水样菌落总数平均值为3291 cfu/ml，p=0.95，v=13，其菌落总数范围在1761与6149之间。 2