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                4.2分子生物学技术
  
引物的作用是(  )
A.打开DNA双链	
B.催化合成DNA子链
C.使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始复制
D.提供模板
解析:选C。引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始复制。
有关PCR反应的叙述中,正确的是(  )
A.PCR反应所需要的引物只是RNA
B.PCR反应所需要的原料是核糖核苷酸
C.PCR反应所需要的酶在60 ℃时会变性
D.PCR反应需要在一定的缓冲液中进行
解析:选D。PCR反应所需要的引物是DNA或RNA;原料是四种脱氧核糖核苷酸;变性是在高温下进行的,所用Taq聚合酶的特点是耐高温,即在高温下不变性。
PCR技术扩增DNA新链之前必须合成(  )
A.DNA解旋酶      	B.引物
C.新的脱氧核苷酸  	D.核苷酸
解析:选B。DNA复制时,合成DNA新链之前必须合成引物。
标准的PCR过程一般分为变性、退火、延伸三大步,这三大步需要的温度依次是(  )
A.94 ℃、56 ℃、72 ℃   	B.72 ℃、50 ℃、92 ℃
C.50 ℃、92 ℃、72 ℃  	D.80 ℃、50 ℃、72 ℃
解析:选A。当温度上升到94 ℃时,作为模板的双链DNA解旋成为单链DNA,称之为变性;当温度下降到56 ℃(40~60 ℃)左右时,两种引物通过碱基互补配对原则与两条单链DNA结合;当温度回升到72 ℃左右(Taq聚合酶的最适反应温度),在单链上4种脱氧核苷酸按照碱基互补配对原则连接在引物之后,使引物链延伸,形成互补的DNA双链,称为延伸。
(2012·徐州高二检测)下列关于DNA复制和PCR的描述中,正确的是(  )
A.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从5′端延伸DNA链
B.DNA复制不需要引物
C.引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合
D.PCR扩增的对象是氨基酸序列
解析:选C。由于DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从3′端延伸DNA链,故DNA复制需要引物,而且它与DNA母链通过碱基互补配对结合。PCR扩增的对象是DNA,而不是氨基酸。
回答下列关于DNA复制与PCR技术的相关问题:
(1)PCR与生物体内的DNA复制有何区别?
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(2)PCR每次循环都可分为________、________和______三步。
(3)________的发现和使用大大提高了PCR的效率,使PCR技术趋向________。
(4)PCR通过控制________来控制双链的________与________。
(5)PCR反应需要一定的缓冲溶液中提供________、分别与两条模板结合的__________、__________种脱氧核苷酸、________的DNA聚合酶。
(6)从第二轮循环开始,DNA聚合酶只能特异的复制________的DNA序列,使这段________的序列呈指数扩增。
解析:本题主要考查关于DNA复制与PCR技术的知识,尤其对PCR技术的考查较细致,可参考答案。
答案:(1)①PCR反应不需要解旋酶,而生物体内DNA复制时需要解旋酶;
②PCR需要耐热的DNA聚合酶,而生物体内DNA聚合酶在高温的时候会变性;
③PCR一般要经历三十多次循环,而生物体内DNA复制需要生物体自身的控制
(2)变性 退火 延伸
(3)Taq聚合酶 自动化
(4)温度 解聚 结合
(5)DNA模板 两种引物 四 耐热
(6)处于两个引物之间 固定长度
 
Taq DNA聚合酶的特点是(  )
A.耐高温  	B.耐盐酸
C.耐强碱  	D.不耐热
解析:选A。Taq DNA聚合酶的特点是耐高温。
有关PCR技术的说法,错误的是(  )
A.PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术
B.PCR技术的原理是DNA双链复制
 
C.利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列
D.PCR扩增中必须有解旋酶才能解开双链DNA
解析:选D。PCR扩增中双链DNA受热变性后会解旋。
在PCR反应中,只有一个DNA的片段作为模板,经过一次循环后,含引物Ⅰ的DNA单链占DNA总链数的(  )
A.1/2  	B.1/4
C.1  	D.1/8
解析:选B。在PCR反应中,只有一个DNA的片段作为模板,经过一次循环后,得到2个DNA分子共4条链,含引物Ⅰ的DNA单链占DNA总链数的1/4。
在下列哪种温度范围内,DNA的双螺旋结构能解开(
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