生防菌FJAT-346对香蕉枯萎病病原菌的抑制作用.docVIP

生防菌FJAT-346-PA及其 生防菌FJAT-346-PA内生香蕉枯萎病(（红色标的这篇是余超已发表的，这一篇题目取什么题目比较好） 肖荣凤，刘波*， （福建省农业科学院农业生物资源研究所，福建 福州 350003） 摘 要55株香蕉铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）离体铜绿假单胞FJAT-346-PA对香蕉枯萎病菌不同菌株均有较好的抑制效果，但菌株间有差异。菌株FJAT-346-PA随着浓度的增加抑制作用增强当病原菌浓度增加时，抑制作用减弱生防菌与病原菌的浓度均为105cfu/mL时，抑制效果最佳。同时发现能破坏香蕉枯萎病菌的菌丝的生长，造成菌丝扭曲变形、细胞壁破裂、纠集成团等现象，到阻碍菌丝萌芽与继续生长的作用106cfu/mL的菌株FJAT-346-PA悬浮液在香蕉苗移栽前的袋苗培养期间浇灌2次，其田间防效可达70%。 关键词：铜绿假单胞菌中图分类号S 432 文献标识码：A香蕉枯萎病由尖孢镰刀菌古巴专化型（Fusarium oxysporum f. sp. Cubense）引起的，是香蕉上最重要的真菌病害，严重地制约着是世界香蕉产业发展(Getha Vikineswary 2002)。病原菌的厚垣孢子在土壤在存活多年，从香蕉根部侵入后，可在球茎及假茎部的维管束组织中扩展与定殖，最终导致植株系统性死亡。土壤中一旦发现该菌，就难以完全清除(Kurtz Schouten 2009)，因此，采用轮作等农业防治措施也不能很好的防治香蕉枯萎病。由于香蕉根系庞大且生育期长达9-11个月，化学防治也难以奏效，大多研究还停留在实验室阶段（王忠全等，2007）。采用无病组培苗和抗病品种能对香蕉枯萎病起到一定的防治效果（Hwang et al,1994; Hwang Ko,2004），但香蕉品种多为三倍体，其雌花高度不孕，所以很难通过杂交方法得到抗病品种。目前的抗病品种多从无性系突变体中选育获得，且均为中抗品种，农艺性状和品质不好，不能很好的满足生产需要(肖爱萍和游春平，2005)。抗病品种和化学药剂难以奏效、农业防治得不到有效实施的情况下，生物防治特别是利用内生生防菌是当前生物防治作物病害热点。 内生细菌是指能在健康植物的组织内定殖，在一定的条件下与植物体建立和谐互惠，互相制约关系的一类微生物（葛红莲等，2006）。植物体是一个十分复杂的微生态系统，几乎所有的植物体内均含有内生细菌。内生细菌不仅能在植物体内定殖，而且对寄主植物有促生、防病等作用（林玲等，2008）。其抗病机制包括生态位竞争或营养竞争、抑菌物质产生及诱导抗性等（Hallmann et al., 1997; Sturz et al., 2000; Lodewyckx et al., 2002) 。利用内生菌防治作物病害在国内外均有报道，相关的内生菌研究包括枯草芽孢杆菌、荧光假单胞菌、铜绿假单胞菌及无致病力的尖孢镰刀菌等（何红等，2002；Saravanan等；2003；Viji等，2003；Leanne M.等，2006）。 本研究拟从香蕉植株体内分离的内生菌中筛选与鉴定出对香蕉枯萎病有良好抑制作用的菌株，并通过平板对峙法、抑菌圈法及电镜扫描法分析菌株在不同条件下对香蕉枯萎病菌的抑制能力，及对香蕉枯萎病的防治效果。1 材料与方法 1.1 供试材料 分离自香蕉植株体内的内生细菌55株（见表1）；病原指示菌为香蕉尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种FJAT-370、FJAT-378，FJAT-389，FJAT-392。以上菌株均由本研究室提供。 培养基：PDA培养基：去皮马铃薯200g, 葡萄糖20g, 琼脂15g，蒸馏水1L；NA培养液：蛋白胨5 g，牛肉膏3 g，葡萄糖10 g，琼脂15 g，PH 7.21.2 方法 1.2.1香蕉枯萎病生防菌的筛选 将内生细菌采用划线法在NA培养基上培养2d，备用；将活化的香蕉枯萎病病原菌FJAT-370在PDA培养基上培养5 d，在菌落边缘用打孔器打6mm的菌饼，备用。采用平板对峙法（方中达，1998），将6mm的FJAT-370菌饼接到PDA平板中央，用接种环挑取少许供试细菌在距离菌饼2.5 cm处划线，每株供试细菌3个重复，以不接供试细菌作为对照。28℃培养4 d，观察结果，计算抑菌率，抑菌率（﹪）=（对照菌落半径-处理菌落半径）/对照菌落半径×100。挑选对香蕉枯萎病病原菌有较强抑制作用的菌株进行菌株鉴定。 1.2.2香蕉枯萎病生防菌FJAT-346-PA的鉴定 （）形态学鉴定 观察菌株在NA平板上的形态特征（参照《常见细菌系统鉴定手册》），利用透射电镜观察菌体形态。 （）生理生化鉴定 依据《