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手性药物液相色谱分析的概念、技术与发展 　　摘 要：手性药物是指药物分子结构中引入手性中心后，得到的一对互为实物与镜像的对映异构体。液相色谱法成为目前手性药物分离测定的首选方法。文章介绍了手性固定相法、手性流动相法和手性试剂衍生化法这三种手性药物液相色谱分析法的概念及特点。 　　关键词：手性药物，液相色谱 　　中图分类号：H083；N04；R17 文献标识码：A DOI：10.3969/j.issn.1673-8578.2016.03.015 　　Abstract： Chiral drugs are a pair of enantiomers which are obtained by introducing chiral centers in the molecular structure of drugs. Liquid chromatography has become the preferred method for the separation and determination of chiral drugs. This paper aims to introduce the concepts and characteristics of chiral stationary phase， chiral mobile phase and chiral reagent derivatization. 　　Keywords：chiral drug， liquid chromatography（LC） 　　引 言 　　手性药物液相色谱分析技术是药物分析领域较新的技术，在药物研发中扮演着越来越重要的角色。下面笔者将对各类手性药物液相色谱分析技术的概念与特点进行介绍，阐述不同类别的手性固定相的分离机制。 　　一 手性药物的概念 　　手性药物（chiral drug），是指药物分子结构中引入手性中心后，得到的一对互为实物与镜像的对映异构体。目前绝大多数在销药物都是以手性的形式存在。手性药物在生物体内的药理活性、代谢过程、代谢速率及毒性等方面存在显著的差异。具体有：（1）只有一种对映体有活性，而另一种无显著的药理活性；（2）两个对映体具有等同或相近的药理活性；（3）两个对映体具有完全不同的药理活性；（4）两个对映体中一个有活性，另一个不仅没有活性，反而有毒副作用；（5）对映体中，一个有活性而另一个可发生拮抗作用[1]。 　　二 手性药物分离分析技术 　　1992年美国食品与药品监督管理局（FDA）的药物评价与研发中心（CDER）公布了手性药物的发展纲要，要求在新药的使用说明中必须明确量化每一种对映异构体的药效和毒理作用，并且当两种异构体有明显的药效和毒理作用差异时，必须以光学纯的药品形式上市[2]。2006年中国国家食品药品监督管理总局也颁布了《手性药物质量控制研究技术指导原则》，要求选择手性分离的方法检测对映异构体。因此，手性药物分离分析技术对于药物的研究与发展具有重要意义。 　　手性药物的理化性质基本相似，仅仅是旋光性有所差别，手性药物的分离分析一直是药物分析领域的难点。目前主要有非色谱法和色谱法两大类，非色谱法灵敏度低，很难进行微量的分离与测定；色谱法灵敏度和重现性高，在手性药物的分离测定中得到了广泛的应用，特别是液相色谱法，已经成为手性药物分离测定的首选方法。 　　三 手性药物液相色谱分析 　　手性液相色谱分析依据手性源引入方式的不同分为手性固定相法（chiral stationary phase，CSP）、手性流动相法（chiral mobile phase，CMP）和手性试剂衍生化法（chiral reagent derivatization，CRD）。 　　1. 手性固定相法 　　手性固定相法，是通过物理吸附或化学键合把手性源合成到原有固定相[3]。手性固定相始于20世纪70年代后期，发展迅速，始终是液相色谱分离手性药物的重点和热点，已有报道的手性固定相达1000多种，其中有200多种被商品化。依据拆分原理的不同分为刷型手性固定相、环糊精类固定相、多糖衍生物固定相、蛋白质手性固定相等。 　　刷型手性固定相是通过一定的间隔臂，连接一个单分子层的手性有机分子到硅胶载体而制得[4]。刷型手性固定相主要通过含末端羧基或异氰酸酯基手性前体与氨基键合硅胶进行缩合反应，分别形成含脲型或酰胺型固定相。刷型手性固定相大都适合正相液相色谱，由于较好的载样能力，非常适合临床前少量药物的分离制备，目前已被广泛应用于π-酸性外消旋体化合物，各种氨基酸、胺类、醇类等手性药物的分离。 　　环糊精类固定相是通过键合或涂敷技术将环糊精或环糊精衍生物的聚合物合成到硅胶等基质表面。其手性识别主要来自环内腔对芳烃